做色谱分析的小伙伴们都知道，反相色谱（RP-HPLC）是应用最为广泛的一种分离模式，它可以分析从低极性到中高极性的多数化合物，常用的键合相类型有C18、C8和苯基等。然而，反相色谱也有它的一个使用局限性：就是一些大极性化合物在常规反相中保留较弱，从而无法进行后续的定性与定量分析。

对此我们该采取什么样的办法呢？

首先，最容易想到的是通过增加流动相中水相的比例以减弱洗脱强度，从而增加极性化合物的保留。一般来说，分析物的极性越大，流动相中水的比例也需要更高。那么问题来了，对于一些常规的C18柱在高比例乃至纯水相中耐受不好，很容易发生孔内干涸，也就是我们常说的“疏水塌陷”。一旦发生很容易出现色谱柱保留减弱等问题。