细胞名称： Caco-2 人结直肠腺癌细胞

贴壁，上皮样细胞

编号： 350769

产品形式： 2mL 冻存管× 2 支、或T25 × 1 瓶；

安全等级： 一级，安全柜或超净台操作

收货须知：收货当天发现异常，请在24 小时内及时联系客服，逾期视为收货良好；冻存管形式，收货后及时置于-80℃冰箱保存，若长时间不使用，应过夜转移至液氮保藏；T25 形式，收货后先培养瓶原装置于培养箱静养4h，然后再对细胞进行常规操作。复苏时每管一次用完不得留存，复苏后传一代，即可正常使用。请严格按照本说明操作，否则造成细胞失活等情形，不予提供补发服务。

培养条件：37℃，5%CO2，CM1-1 培养液。CM1-1 培养液：90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM 高糖培养液，含谷氨酰胺，含丙酮酸钠。

复苏步骤：①新制100mm 平皿1 个，含12mL 上述培养液；②冻存管从液氮或-80℃中取出，37℃水浴1~2min,待*溶解后尽快移入安全柜复苏；③用无菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中，顺时针摇匀；④放入（37℃，5%CO2）培养箱中，过夜换液，2-4 天长满。

传代/冻存：将旧培养液吸除，PBS 清洗两遍后，加入6mL（/100mm 皿）胰酶，在显微镜下观察，期间禁止摇晃培养皿，细胞刚有脱落时，则吸除大部分胰酶，留约0.5mL，移至培养箱消化，约5min 取出。传代用12mL CM1-1 培养液终止消化，轻轻吹打均匀细胞，后可分3~6 皿培养；冻存则用6mL 冻存液（90%FBS+10%DMSO）终止消化，吹打均匀，分为6 支冻存管，用程序降温盒于-80℃冻存。