台盼蓝染色原理

台盼蓝（Trypan blue）是一种细胞活性染料，常用于细胞计数和细胞活力检测。它可以通过细胞膜进入细胞，并与细胞内的核酸结合，使细胞呈现蓝色。对于丧失活性或细胞膜不完整的细胞，其细胞膜通透性增加，台盼蓝染料可以进入细胞内，使细胞染成蓝色。通过观察被染成蓝色细胞的数量，即可得出对应的细胞浓度。

细胞计数的操作流程

1-准备工作

·准备细胞悬液：将待检测的细胞培养至适当浓度，收集细胞并制备成细胞悬液。

·准备台盼蓝染料：将0.4台盼蓝染料用PBS缓冲液稀释至0.2%。

·准备细胞计数仪和计数板：使用全自动细胞计数仪（JSY-SC-031H）和血细胞计数板、盖玻片进行细胞计数。

·准备移液器和吸头：使用移液器和吸头吸取细胞悬液和台盼蓝染料。

2-加入台盼蓝染料

·取适量的细胞悬液与离心管中。

·加入等量的台盼蓝染料（0.2%），再用移液枪轻轻吹打混匀。

3-上机检测

·用移液器取10uL细胞混合液，加入血细胞计数板中。

·将加样后的血细胞计数板放至细胞计数仪（JSY-SC-031H）的载物台上，选择对应的计数模式，即可开始细胞计数分析（浓度计算公式=（四个大方格内细胞数之和）/4×（稀释倍数）×10⁴）。

4-查看结果数据

计数完成后，点击数据详情，查看细胞浓度、细胞直径、细胞聚团率等数据。

注意事项

1-台盼蓝染料具有一定毒性，操作时需佩戴手套和口罩，避免接触皮肤和吸入气体。

2-台盼蓝染料需避光保存，避免阳光直射。

3-台盼蓝染料适用于大多数细胞类型，但无法很好的区分细胞和杂质，因此不适用于原代细胞、PBMC等含有大量杂质碎片的细胞类型。

4-加样前，可将台盼蓝静置数分钟，取上层。

5-加样时，应尽量避免气泡的产生，以免影响细胞计数的结果。

台盼蓝染料是一种常用的细胞活性染料，可用于细胞计数和活力检测。在使用台盼蓝染料进行细胞计数时，需要注意操作流程和注意事项，以确保结果的准确性。