AlphaSureFire细胞激酶检测试剂盒是由PerkinElmer 所研发出的新型态细胞内磷酸化蛋白质侦测技术。此技术几乎不具有任何技术门槛，只要会使用Pipetman 就可以进行实验！流程简单，从拿到待测检体开始到取得侦测结果，只要三个步骤就能完成。Alpha SureFire 除了具有无技术门槛以及操作流程简单的特性之外，还拥有优于Western Blot、ELISA 的侦测灵敏度与侦测区间，不但可减少样品用量、提高解析度、并且具有量化的数据显示方式，弥补了传统Western Blot 与ELISA 的不足之处。

本系列产品亦可适用于细胞内非磷酸化蛋白质的侦测，例如：GAPDH, Akt, Erk, p53, Topo IIa等。

AlphaSureFire细胞激酶检测试剂盒产品特点：

侦测灵敏度高，细胞可不经任何基因转染(transfection) 或大量表现(over-expression) 过程，即可直接进行侦测。

适用多种哺乳动物细胞株以及初代细胞(primary cell)。

全均质化(homogeneous) 操作步骤，流程简单且不需分离或洗涤步骤，可快速完成侦测实验。

产品种类丰富，涵盖各种热门细胞讯息传递路径，如：Akt, JAK/STAT, MAPK, mTOR, NF-kB, TGFb/Smad signaling pathway 等。

AlphaSureFire细胞激酶检测试剂盒作用原理：

AlphaSureFire细胞激酶检测试剂盒作用原理类似Sandwich ELISA，以「AlphaSureFire p-Erk」侦测试剂为例，当cell lysates 样品中含有待测的特定磷酸化蛋白质"p-Erk" 时，带有Erk 专一性抗体的Donor Bead、与带有phospho Erk 专一性抗体的Acceptor Bead，就能够经由抗体与标的蛋白间的专一性结合而靠近，此时以680 nm 雷射光激发Donor Bead，即可藉由能量转移反应测得Acceptor Bead 所发出的520-620 nm 萤光讯号。

AlphaSureFire细胞激酶检测试剂盒产品效能：

采用AlphaSureFire侦测平台可得到量化的实验结果，让研究者能够更清晰地辨识出实验组(CTL)与对照组(UV)之间的磷酸化蛋白质表现差异程度。

AlphaSureFire可适用在Primary Cell的磷酸化蛋白质侦测。

AlphaSureFire不需over-expression就能直接测得细胞内原始的磷酸化蛋白质含量。以未经刺激活化过的HUVEC细胞作为研究对象，并以不同浓度的U0126抑制剂(MEK inhibitor, Calbiochem)或LY294002抑制剂(PI3K inhibitor, Calbiochem)分别投与HUVEC细胞培养皿中作用，接着以AlphaSureFire phospho-ERK Assay Kit (Cat# PK-TGRES500)来侦测HUVEC细胞内的磷酸化ERK1/2含量。左图为进行三重复实验后所得到的实验结果。结果显示相较于用来作为对照组的非MAPK pathway抑制剂LY294002 2 (▲)，U0126抑制剂(●)的确可专一性地抑制MEK磷酸化ERK1/2的反应，且其抑制活性IC50: 100 nM与1998年Duncia et al.研究团队发表于Bioorg Med Chem Lett.期刊的研究结果相似。 

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