人胰岛素原  (PI)ELISA使用说明书

胰岛素原(PI)是胰岛素的前体激素 ， 它是由由胰岛β细胞合成和分泌 ， 主要 在肾脏分解代谢。生理情况下 ，只有极少量的胰岛素原释放入血 ，在病理情 况下 ，胰岛β细胞释放胰岛素原增多 ，血中胰岛素原水平升高。 它是细胞在 裂解成成熟胰岛素之前分泌的最后一个单链蛋白结构。 它是由芝加哥大学的Donald F. Steiner教授在1967年发现的。

本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA） 。往预先包被有人 胰岛素原(PI)捕获抗体的微孔中 ，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测 抗体 ，HRP  酶结合物 ， 中间经过温育和洗涤 ，用底物TMB  显色 ，TMB 在过 氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色 ，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色 的深浅和样品中的人胰岛素原(PI)呈正相关。用酶标仪在 450nm  波长下测定

吸光度（OD  值） ，计算样品浓度。

灵敏度：4.79pg/mL

检测范围：12.5-800pg/mL

特异性：可检测样本中人的PI ，且与其类似物无明显交叉反应。

试剂盒性能：

1.    重复性 ：板内变异系数小于  10% ，板间变异系数小于  10%。

2.    回收率 ：在选取的健康人血清、血浆和细胞培养上清中加入  3  个不同

浓度水平的人PI ，计算回收率。

3.    线性稀释：分别在选取的4份健康人血清、血浆和细胞培养上清中加入

高浓度人PI ，在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。