今天开讲之前，先给大家看一组九宫格图，开开眼界~~

这是将色谱柱的入口端打开后的样子，也就是色谱柱中先接触到样品的填料。

正常的色谱柱入口端填料绝大多数应该是白白的、平整的，而这些是受到严重污染的色谱柱——变色、堵塞、杂质蓄积......

OMG！

柱子造的都没“柱”样了！

那怎么办？

如何避免色谱柱过早地“夭折”呢？

 办法还是有滴~~

通常，在分析柱前面，安装一支保护柱就能大大减少损失。

那么，今天我们一起来学习一下，保护柱的重要性吧。

1、 为什么要使用保护柱？

2、 哪些样品需要使用保护柱？

3、 保护柱会不会影响分离效果？

4、 如何选择保护柱？

5、保护柱的使用及注意事项有哪些？

01

 为什么使用保护柱呢？

样品上机检测前，一般会经前处理去除杂质，但是不能*避免，来自于样品及色谱系统的微小的固体颗粒物、色素杂质、未沉淀的蛋白等，可能会滞留在色谱柱中，从而导致色谱柱耐用性差、寿命缩短。

保护柱是安装在分析柱之前的小柱，能起到分离净化的作用，大大降低分析柱受污染的程度，延长分析柱使用寿命，因此为您节省很多的耗材费用。

02

 哪些样品需要使用保护柱？

常规的液相色谱检测中均需要使用保护柱，特别是对于食品、中药、天然产物、合成中间体、复杂制剂及血浆等生物样品的检测，因待测基质的复杂性，可能会导致色谱系统压力升高、色谱柱堵塞、填料变色、测试结果不准确等各种影响。

03

保护柱会不会影响分离效果？

通常来讲，理想的保护柱填料与分析柱填料一致，具有相同的选择性，被测物基本上全被洗脱出来，不会影响待测物的响应值。

保护柱柱长选择恰当的话，不会产生峰扩散，也基本不会引起分离度的降低。

图1 是安装卡套式保护柱后的对比色谱图，保留时间略微有延迟（原因是安装了保护柱，色谱柱相当于长了一点点）。总体来讲，卡套式保护柱对分析结果基本无影响。

图1

【液相条件】
色谱柱：CAPCELL PAK C18 MGIII-H S3; 2.0 mm i.d. x 100 mm
保护柱：CAPCELL PAK C18 MGIII-H S3; 2.1 mm i.d. x 5 mm
流动相：60%乙腈
流　速：0.5 mL/min
温　度：40℃
检　测：UV 254 nm
样　品：萘（峰4）

04

 如何选择保护柱？

1、保护柱与分析柱应具有相同填料、相同粒径、相同内径，以确保选择性一致（同一个品牌）。

2、一般长度为10mm的保护柱可以起到充分的保护作用，过长的话可能会引起待测物的谱带扩张。

3、尽量选择可更换柱芯的的保护柱，柱芯价格相对便宜，易于使用和维护，而且死体积小。

4、如果是用于UHPLC柱，还要考虑一下保护柱的耐压能力。

05

 保护柱的使用及注意事项有哪些？

安装

1、卡套式保护柱一般标注液流方向，请按照色谱柱标签所示方向进行安装，尽量不要双向混用。

2、卡套式保护柱可以更换柱芯，对于CAPCELL PAK 系列保护柱，即使柱芯内径不同，只要柱芯的长度相同，柱套既可通用。

3、保护柱与卡套组装好后，请直接连接在色谱柱入口端。一般用手拧紧卡套即可，如有漏液发生，可再使用扳手拧紧30°，用力太过有可能导致压环变形。

使用注意事项

1、专柱，避免保护柱成为不同项目的交叉污染源。

2、当色谱峰的理论塔板数下降，柱压上升，或是关键分离度下降时，都应该及时更换保护柱。

3、不慎发生强污染时，可以将分析柱卸下，单独冲洗保护柱，可以使污染物更快的从保护柱中流出。

4、保护柱或柱芯一般不建议超声清洗，因可能对填料表面修饰有影响，当柱效下降时直接更换柱芯。

后，再给大家介绍2款靠谱的保护柱吧，一款是应用于HPLC的保护柱，另一款是应用于UHPLC的保护柱。

TIPs 知识扩展

1 CAPCELL PAK 卡套式保护柱 （应用于HPLC）

产品特点

1、应用于高效液相色谱，CAPCELL PAK 系列分析柱均有配套的保护柱。

2、CAPCELL PAK 保护柱，即使柱芯内径不同，只要柱芯的长度相同既可通用。

3、只对单价较低的柱芯进行更换即可实现对分析柱的保护。

.2 CAPCELL EXP 卡套式保护柱 （应用于UHPLC）

产品特点

1、高耐压 100 MPa，可用于超高效液相色谱。

2、几乎无扩散，对分离的影响降低到极低限度。

3、可直接连接到色谱柱上，不会产生死体积的影响。

4、不需要工具，用手拧紧即可简便连接。