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选择一款适合梯度PCR仪应该注意什么

时间:2021-02-04      阅读:1246

  PCR技术是一种用于放大扩增特定的DNA的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,目前市场上常见的有:普通PCR仪、梯度PCR仪、原位PCR仪、荧光定量PCR仪(qPCR)以及数字PCR仪(dPCR)等。而使用多是梯度PCR仪和荧光定量PCR仪,那么怎样选择一款适合自己的梯度PCR仪呢?
  1 准确的温度控制系统
  对PCR仪来说,温度控制指标主要是指温度的准确性、均一性、以及升降温速度。
  温度的准确性:是指样品孔温度与设定温度的一致性,它直接关系到实验的成败。由于PCR是一个几何级数扩增的过程,不论是变性、退火还是延伸都需要准确控制温度,对退火温度而言温控显的尤为重要,有时1°甚至0.5°的差异也能决定实验的成功与失败,所谓差之毫厘,谬之千里。因而对PCR扩增仪而言温度控制就意味着质量。eg:HealForce B960的温度准确性严格控制在≤0.1℃。(国内大部分厂家仅要求≤0.2℃)
  温度的均一性:是指样品孔间的温度差异,它关系到在不同样品孔进行反应结果的一致性。有用户发现用同样的样品,同样的PCR反应程序,后的结果竟然差异非常明显,或许就是因为不同位置的温度不均匀所致。同时位置边缘效应对PCR实验可重复性影响非常明显。
  升降温速率:更快的升降温速度,可以缩短反应进行的时间,而且缩短了可能的非特异性结合、反应的时间,能提高PCR反应的特异性。
  2  仪器的功能性和人性化设计
  越友好的操作界面、完善的功能以及人性化的设计更能吸引用户。(热盖、样品座、软件)
  热盖:现在的PCR仪一般均配备热盖,热盖温度设为105℃,使样品管顶部的温度达到105℃左右,蒸发的反应液就不会产生凝集在管盖上而改变反应体积,这样用户就无需再向反应管内加石蜡油,直接减少后继反应的麻烦。HealForce热盖温度范围为:20-110℃。
  样品座:PCR反应多在0.2或者0.5的管子中进行,多数PCR仪也配备了不同的可更换样品槽适配不同的样品管。HealForce PCR仪一个槽内带有0.2和0.5两种不同样品孔,不需更换基座就可以分别使用两种不同的反应管,或者96孔板,避免了换基座的麻烦。
  软件:新的PCR仪都比较注重程序编写的简易性。大屏幕,显示实时信息,倒计时,记忆存储多个程序、自动断电保护等都有助于实验室中的复杂环境使用。HealForce T960和B960 PCR仪基于Windows操作系统,配备了PC端软件,可以实现智能化操控。
 
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