胎牛血清质检标准解读
时间:2024-04-22 阅读:830
【胎牛血清】
胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)指通过对未出生的胎牛行穿刺采血,再经自然层析、离心、过滤等处理而得到的上清液。在细胞培养体系中,血清是不属于人工合成的成分,同时也让血清成分成为细胞培养体系中最大的不确定因素,因此,如何保障胎牛血清的质量是细胞培养得好坏的决定性因素之一。
【胎牛血清的检测指标】
胎牛血清的COA中,常规的检测标准包括内毒素、总蛋白、支原体、细菌、病毒、渗透压、总蛋白等。胎牛血清产品分析证书(COA)就是FBS质控的重要体现。
【理化检测】
外观
胎牛血清外观颜色根据血红蛋白含量的不同,呈现出的浅棕色或琥珀色,优质的胎牛血清应该是浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。但不同批次间的同一款血清,颜色上也可能存在一定差异。
PH
《中国药典2020版》中对新生牛血清的标准 pH 值应为7.00~8.50。药典中未明确对胎牛血清做出pH 值要求,行业内均以此为参考。一般采用电位法进行测定。
渗透压
渗透压的检测一般采用冰点下降法,渗透压是为了维持细胞张力,调节细胞的代谢。渗透压摩尔浓度(mOsmol/kg):250-330之间。
总蛋白
测量血清中蛋白质总含量可确认动物的年龄及符合产品的规格,采用的双缩脲法进行检测,该方法实验反应产生的紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,故可用来测定蛋白质含量。
血红蛋白
红蛋白含量决定血清色泽的因素是血红蛋白和胆红素,前者含量高,则呈现偏红的颜色,后者高则呈现为金黄色。
细菌内毒素
内毒素会因为启动补体活性而产生细胞毒性,内毒素控制在10EU/ml以内符合国家标准,过高的内毒素将会对部分细胞产生刺激作用,影响细胞生长。