Duckembyro鸭胚胎成纤维细胞

1） 来源：蒂科生物细胞库

2） 形态：贴壁 成纤维细胞样

3） 含量：>1x106 个/mL

4） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

6） 运输：顺丰发货

培养条件：

培养基：FM(sciencell,cat:2301)(推荐HAKATA货号:HN-FBS-500）

温度：37℃     气相：95%空气，5%二氧化碳

传代：

1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液；

2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，传代比例为1:2到1:4；

3传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（diyi次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为zuijia消化时间，记录zuijia消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml*培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之*脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入*培养基重悬细胞，进行传代。

冻存：

建议使用本公司无血清细胞冻存液货号：H-W-100，用4度保存的冷冻液直接重悬细胞，不能预热后使用。

保存条件：液氮存储

温馨提示：（常见问题，处理方式）

T25瓶为例；

1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml*培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。

3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

注：diyi次传代推荐传代比例为1:2，以后传代比例可根据客户需要自己决定。

细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。

热销细胞：M001 3T3-L1 小鼠胚胎成纤维细胞 DMEM(H)+10%NCS 贴壁 成纤维细胞样

M002 NIH/3T3 小鼠胚胎细胞 DMEM(H)+10%NCS 贴壁 成纤维细胞样

M003 Raw264.7 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 DMEM(H)+10%FBS 贴壁 部分悬浮 圆形

M004 B16-F10 小鼠黑色素瘤高转细胞 DMEM(H)+10%FBS 贴壁 上皮样和纺锤形混合

M005 B16 小鼠黑色素瘤细胞 DMEM(H)+10%FBS 贴壁 上皮样和纺锤形混合

M006 CT26.WT 小鼠结肠癌细胞 DMEM(H)+10%FBS 贴壁 成纤维细胞样

M007 SV40 MES 13 小鼠肾小球系膜细胞 DMEM/F12(3:1)+14 mM HEPES+5%FBS 贴壁 肌成纤维细胞样

M008 F9 小鼠畸胎瘤细胞 DMEM(H)+10%FBS 贴壁 上皮样

M009 MLE-12 小鼠肺泡上皮细胞 DMEM(H)+10%FBS 贴壁 上皮样

M010 Sp2/0-Ag14 小鼠骨髓瘤细胞 DMEM(H)+10%FBS 悬浮 淋巴母细胞样

M011 BV 2 小鼠小胶质细胞   1640+10%FBS 贴壁 上皮样 多种混合

M012 DC2.4 小鼠树突状细胞 1640+10%FBS 贴壁 树突状

M013 U14 小鼠子宫颈癌细胞 DMEM(H)+10%FBS 贴壁 上皮样

M014 M-NFS-60 小鼠骨髓性白血病细胞 1640+10%fbs+62 ng/ml M-CSF+0.05mM2-巯D基D乙D醇 悬浮 淋巴母细胞样

M015 mMSC 小鼠骨髓间充质干细胞 DMEM/F12+10% FBS 贴壁 成纤维细胞样

M016 HL-1 小鼠心肌细胞 DMEM+10%FBS 贴壁 成肌细胞样

M017 tm3 小鼠睾丸间质细胞 df12+5%hs+5%fbs 贴壁 上皮样

M018 k7m2.wt 小鼠骨肉瘤成骨细胞 DMEM+10%FBS 贴壁 成骨细胞样

M019 mc3t3 e1 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞 DMEM+10% FBS 贴壁 成纤维细胞样

M020 hepa1-6 小鼠肝癌细胞 DMEM+10% FBS 贴壁 上皮样

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