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人疱疹病毒 6 型 PCR 试剂盒说明书

时间:2024-05-16      阅读:25

人疱疹病毒 6 PCR 试剂盒说明书

【产品名称】

商品名称:人疱疹病毒 6 PCR 试剂盒

Name Human Herpesvirus-6 (HHV-6) PCR Kit

【包装规格】50 /

【产品及特点】

人疱疹病毒 6 (Human Herpesvirus-6,HHV-6)是从淋巴增生性疾

病和艾滋病患者淋巴细胞中培养获得的一种新病毒,可通过唾液飞沫及密

切接触(如接吻,共用餐、饮器具等)、输血传播。除免疫低

下(如先天性免疫缺陷、艾滋病、长期服用免疫抑制剂等)外,绝大多数

人感染后终身都不会产生明显症状;免疫低下者,如 HIV 感染者,当人

体特异性免疫被削弱至一定程度时, 潜伏的病毒可被激活并产生急性感

染症状,此时会出现间质性肺炎、脑炎、脑膜炎、肝炎及多器官衰竭等症

状,活化的病毒可大规模感染 T 淋巴细胞,使免疫功能进一步削弱,该

病毒对人体健康有较大影响,因此检测人疱疹病毒 6 DNA 具有重要意

义。本产品就是根据 PCR 原理开发的、检测此病毒的试剂盒。本产品具

有下列特点:

1.即开即用,用户只需要提供病毒 DNA 模板。

2.引物经过精心优化,专一性强,只扩增人疱疹病毒 6 型病毒 DNA,与

其他病毒没有交叉反应。

3.提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4.PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。

5.本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。

【规格及成分】

编号 十孔盒包装

PCR MagicMix 3.0 63981 1 mL(红盖)

超纯水 109350 1 mL(亮黄色)

人疱疹病毒 6 PCR 引物混合液 3026yw 100 μL(白盖)

人疱疹病毒 6 PCR 阳性对照

1×10E8 拷贝/μL

93981-3026pc 50 μL(黄盖)

使用手册 LZ3026 1

【运输及保存】

低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。人疱疹病毒 6 PCR 阳性对

照需要单独放置,不要污染其他试剂。

【自备试剂】

样品 DNA

【使用方法】

一、样品 DNA 的制备

用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA

提取试剂盒兼容。

2.如果有 N 个样品,则需做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和

一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是人疱疹病毒 6 PCR 阳性

对照的 1000 倍稀释液,其总体积等于试剂盒所需的样品量,样品制备阴

性对照是直接用水。

二、设置 PCR 反应(40μL 体系)

3.N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR

性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 PCR 管中分别加入下列成

分:

成分

N+2

样品管

PCR 阴性

对照

PCR 阳性

对照

PCR Magic Mix 3.0 20 μL 20 μL 20 μL

人疱疹病毒 6 型通用 PCR 引物混

合液

2 μL 2 μL 2 μL

N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL - -

PCR 阴性对照(水) - 18 μL -

PCR 阳性对照(人疱疹病毒 6 型通

PCR 阳性对照的 1000 倍稀释

液)

- - 18 μL

4.按下表设置 PCR 反应: 过程 温度 时间

预变性 955 min

PCR 反应

35 个循环)

9515 sec

5515 sec

7230 sec 最后延伸 7210 min 三、电泳检测

5.5μL PCR 产物电泳进行检测。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束

后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR 产物长

度为 481bp。阳性对照必须有此条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否

则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增

以排除 PCR 抑制剂的感染。

 

 


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