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常规PCR Kit （经典法）(不含Taq酶）
Venor® Gem Classic
品名 | 货号 | 规格 | 价格 |
常规PCR Kit （经典法）(不含Taq酶） Venor® Gem Classic | 11-1025 | 25次/盒 | 询价 |
11-1050 | 50次/盒 | 询价 | |
11-1100 | 100次/盒 | 询价 | |
11-1250 | 250次/盒 | 询价 |
特点
1.内控对照为独立包装，遵循欧洲药典和日本药典操作流程。
2.高特异性，仅一条阳性对照条带，即可涵盖所有可能感染细胞的支原体物种。操作简单，
易于观察。
3. 高灵敏度，若PCR反应体系加入10μl样本，支原体检测限度为≤5或≤10CFU。
(详见下文“(2)Venor® Gem Classic Kit 10种常见支原体检测限“)
4.欧洲药典要求的26种支原体均可检出。该试剂盒可检测出1种脲原体、7种无胆甾原体和85种支原体，与细菌和真核DNA无交叉反应。
5.试剂盒中不含Taq酶，可另外购买。推荐使用德国MB公司专用Taq酶。(货号: 53-1050)
Venor® Gem Classic Kit
10种常见支原体检测限
物种 | 检测限 | 物种 | 检测限 |
莱氏无胆甾原体 | ≤5 | 肺炎支原体 | ≤10 |
猪鼻支原体 | ≤10 | 精氨酸支原体 | ≤10 |
发酵支原体 | ≤10 | 鸡败血支原体 | ≤10 |
口腔支原体 | ≤10 | 螺原体 | ≤10 |
关节液支原体 | ≤10 | 唾液支原体 | ≤10 |
操作步骤
第1步：样本处理
a. 细胞培养上清
b. 生物药或需遵循药典的样本
说明：①样品基质可能会影响检测的灵敏度。收集和筛选更高的样品量可提高测定灵敏度。
②细胞培养物样本含丰富的DNA酶，在低温下也能降解支原DNA，影响检测灵敏度。
建议：样本做DNA抽提处理，实现最高灵敏度。
推荐：德国MB公司生产的专用支原体DNA提取试剂盒，Venor® Gem Sample Preparation Kit。该DNA抽提试 剂盒已经过广泛验证。
第2步：试剂制备
第3步：PCR体系建立
a. 细胞培养上清
b. 生物药或需遵循药典的样本
第4步：启动PCR反应
第5步：电泳结果分析
191bp为内控对照条带，表明PCR反应正常。
当样本存在支原体污染时，由于内控对照与支原体DNA存在竞争，内控对照条带变弱（例如支原体DNA＞103拷贝）。
阳性对照中支原体DNA＞104拷贝，内控对照条带会*消失。
可能在80-90bp存在引物自退火形成的条带，此条带不影响检测结果。
如果待测样本对PCR产生抑制，则内控对照条带变弱（和阴性对照相比），此时应先进行DNA抽提（推荐使用：Venor® Gem Sample Preparation Kit 支原体DNA抽提试剂盒，详见第25页），然后再检测。
储存条件
2~8℃至少6个月。复溶后在-18℃保存。
效期
1年6个月
