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植物血凝素的生物学功能与应用指南

时间:2024-08-19      阅读:393

产品介绍:

 

植物血凝素(Phytohemagglutinin, PHA)是指从红芸豆(Phaseolus Vulgaris)中提取的一种菜豆类凝集素。它是由4个亚基通过非共价键结合形成的四聚体糖蛋白,包含两种亚基分子,L亚基(白细胞凝集素)和E(红细胞凝集素),含有5种异构体(L4,L3E1,L2E2,L1E3 和E4)。L亚基具有白细胞凝集和高促有丝分裂活性;E亚基具有高红细胞凝集和低促有丝分裂活性。

 

根据不同的亚基组成,PHA可以分为几种不同的形式,主要包括PHA-L、PHA-E、PHA-P和PHA-M。以下是它们的在科学研究中的主要用途:

 

PHA-L:

 

主要功能:PHA-L是纯化的L4四聚体,主要作为T淋巴细胞的刺激原,广泛用于免疫学研究。它可用作INF-γICS、ELISPOT实验的阳性对照;PBMC培养的刺激物;顺行神经示踪剂等。

生物学活性:具有高促有丝分裂活性和白细胞凝集活性,但红细胞凝集活性极低。

应用:主要用于刺激T细胞增殖和免疫反应研究。

 

PHA-E:

 

主要功能:PHA-E是纯化的E4四聚体,主要用途是红细胞凝集或者糖基化修饰的研究。

生物学活性:具有高红细胞凝集活性和低促有丝分裂活性。

应用:主要用于红细胞凝集实验和糖基化研究。

 

PHA-P:

 

主要功能:PHA-P是在分离和纯化PHA-L和PHA-E前的PHA的蛋白质形式,成分与PHA-M相当。

生物学活性:具有促进有丝分裂和诱导干扰素分泌的活性。

应用:主要用于刺激外周单个核细胞增殖,促进某些细胞因子的产生和膜表面蛋白的表达。

 

PHA-M:

 

主要功能:PHA-M是植物血凝素的粘性蛋白形式,成分与PHA-P相当。主要用于刺激外周单个核细胞增殖,促进某些细胞因子的产生和膜表面蛋白的表达。

生物学活性:具有促进有丝分裂和诱导干扰素分泌的活性。

应用:广泛用于免疫学研究,特别是在细胞增殖和细胞因子产生方面。

 

客户应用实例:

 

应用一、使用PHA-L(abs47014909)预刺激Jurkat T细胞,探究小分子PROTAC介导靶向蛋白降解治疗STAT3依赖性上皮癌症的机制[1]

 

将HCT116细胞以1×104个细胞/孔的密度接种到12孔板中进行附着,随后用TSM-1(1μM)处理24h。然后,使用PHA(10μg/mL)和PMA(10ng/mL)预刺激Jurkat T细胞(6×104)4h。HCT116细胞与活化的Jurkat T细胞共培养24h。ELISA试剂盒用于检测上清液培养基中IL-2的水平,IL-2是监测T细胞活化的生物标志物。用结晶紫染色法对潜在的癌症活细胞进行虚拟化。将细胞溶解在10%乙酸中后,使用Cytation 5酶标仪(BioTek)在595nm下对细胞进行定量。

 

图1  TSM-1在体外诱导T细胞活化和浸润

 

应用二:使用PHA-M(abs47014911)培养Jurkat T细胞,探究氟化物干扰免疫系统的机制[2]

 

Jurkat T细胞(HTX4056,Otwo Biotech)在RPMI 1640培养基中生长,培养基补充了10%胎牛血清(FBS,abs972,Absin)、青霉素-链霉素溶液和5ug/mL植物血凝素-M(abs47014911,Absin),5ug/mL Ultra LEAFTM纯化的抗人CD28。细胞系在37°C, 5%CO2和95%空气的加湿培养箱中培养。

 

图2 氟化物可以抑制T细胞活化,阻碍T细胞受体的内化

 

PHA的不同形式主要区别在于它们的亚基组成和相应的生物学功能。PHA-L和PHA-E分别具有高促有丝分裂活性和高红细胞凝集活性,而PHA-M和PHA-P则主要用于刺激细胞增殖和细胞因子产生。每种形式在免疫学研究和细胞生物学研究中都有其特定的应用。

 


参考文献


[1] Jin J, Wu Y, Zhao Z, et al. Small-molecule PROTAC mediates targeted protein degradation to treat STAT3-dependent epithelial cancer[J]. JCI Insight. 2022;7(22):e160606.

[2] Zhu S, Liu B, Fu G, et al. PKC-θ is an important driver of fluoride-induced immune imbalance of regulatory T cells/effector T cells[J]. Sci Total Environ. 2024;934:173081.

 

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货号

品名

规格

abs47014910

植物血凝素-L 溶液(500×)

100uL

abs47014909

植物血凝素-L(菜豆)

5mg

abs47014911

植物血凝素-M(菜豆)

5mg

abs47014912

植物血凝素-E(菜豆)

5mg

abs47014913

植物血凝素-P(菜豆)

5mg




 

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500mL×10

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青霉素-链霉素溶液(100×,双抗)

100mL







 

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