一、elisa酶联免疫试剂盒价格基本原理

弯曲杆菌（Campylobacter spp.）是一种重要的食源性病原菌。弯曲杆菌属（Campylobacter genus）包括6个种及若干亚种。其中空肠弯曲杆菌(C. jejuni)、结肠弯曲杆菌(C. coli)和胎儿弯曲杆菌(C. fetus)占所有从人体分离的99%（空肠弯曲杆菌占90%）。空肠弯曲杆菌为革兰氏阴性微需氧细菌。其培养条件苛刻，在空气中不能生长，在普通培养基上也难以培养。在微需氧条件下（85 % N2, 5% O2 和10% CO2）在凝固血清和血琼脂培养基上培养48小时可见无色半透明的小菌落，zui适生长温度为42°C，在37°C下也能培养，但生长速度较慢。弯曲杆菌增菌用布氏肉汤液体培养基。常用的生长培养基为Skirrow固体培养基和Camp-BAP固体培养基。弯曲杆菌耐药实验所用培养基为MH固体培养基。为了保证弯曲杆菌的生长，通常需要在固体培养基中加入5%（v/v）的脱纤维裂解羊血。本实验简述弯曲杆菌所用培养基、培养条件、菌株分离注意事项和菌株保存方法。

二、弯曲杆菌的培养

1、培养基的配制

1）、Camp-BAP固体培养基的配制：
称取8.92g培养基，溶于200ml蒸馏水中高压灭菌，待冷却至55°C左右加入200ul添加剂A、200ul添加剂B和10ml脱纤维裂解羊血，充分摇匀后倒平板。(添加剂A和B为购买附带)。

2）、Skirrow固体培养基的配制：称取8.5g培养基，溶于200ml蒸馏水中高压灭菌，待冷却至55°C左右加入2ml FBP原液和10ml脱纤维裂解羊血，充分摇匀后倒平板。

FBP原液配置：分别称取0.5g焦亚硫酸钠、0.5g丙酮酸钠和0.5g硫酸亚铁，溶于20ml蒸馏水中，滤膜过滤除菌，放置4°C冰箱可保存一周。

3）、布氏肉汤增菌液的配制：

称取28.1g布氏肉汤粉末，溶解于1000ml蒸馏水中高压灭菌，冷却后备用。

2、增菌培养

将新鲜食品，如鸡肉，减碎，取5g置于50ml离心管中，加入布氏肉汤至液面覆盖鸡肉样品，拧紧离心管，先在37°C下预增菌4小时，在加入100 ul头孢哌酮（30mg/ml），并颠倒混匀，放置在微需氧培养箱中42°C培养48小时。

3elisa酶联免疫试剂盒价、菌株保存方法

挑取单克隆菌株在Skirrow固体培养基上平板划线，放置在42°C的微需氧环境下培养48小时，用灭菌棉签从平板上刮下长出的菌落，悬浮在50%甘油的布氏肉汤保种液中，置于-80°C超低温保存。在-20°C冰箱中保存效果较差，存放一周后细菌复苏率即显著下降。此外，保存菌株需要每隔一年重新活化保存一次。

三、elisa酶联免疫试剂盒价格注意事项

（1）、由于弯曲杆菌是微需氧的细菌，生长条件苛刻，存在分离率低、培养复杂且难以保存的问题。从食品中分离弯曲杆菌首先要保证食品的新鲜度，此外还可通过布氏肉汤增菌步骤来提高分离率。

（2）、弯曲杆菌的生长力较弱，容易受到大肠杆菌、沙门氏菌等杂菌的污染，因此微生物实验操作过程应保持无菌，为降低杂菌污染，也可在培养基中加入万古霉素和多粘菌素B。

（3）、弯曲杆菌培养用的血平板应保持新鲜。脱纤维裂解羊血在4°C条件下可保存两周，制备好的血平板在4°C条件下zui多保存一周。
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