小鼠转化生长因子αelisa检测试剂盒操作流程
时间:2022-05-12 阅读:158
小鼠转化生长因子αelisa检测试剂盒操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
人肝星形细胞*培养基
人肝窦内皮细胞*培养基
人胃粘膜上皮细胞*培养基
人直肠平滑肌细胞*培养基
人胎盘羊膜细胞*培养基
人胎盘滋养层细胞*培养基
人胎盘绒毛膜细胞*培养基
人子宫平滑肌细胞*培养基
人子宫成纤维细胞*培养基
人卵巢上皮细胞*培养基
人卵巢成纤维细胞*培养基
人卵巢微血管内皮细胞*培养基
人子宫内膜上皮细胞*培养基
人子宫颈上皮细胞*培养基
人睾丸支持细胞*培养基
人肾小球内皮细胞*培养基
人肾管状上皮细胞*培养基
人肾皮层上皮细胞*培养基
人肾上皮细胞*培养基
人输尿管上皮细胞*培养基
人肾实质细胞*培养基
人肾系膜细胞*培养基