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产品名称 | 非大提柱式植物 DNAout4次图片 |
规格 | 100mL |
价格 | 电询 |
公司非大提柱式植物 DNAout4次图片的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品:点击了解更RNA纯化。
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
非大提柱式植物 DNAout4次图片的详细介绍:
非大提柱式植物 DNAout4次图片NA提取流程图:
问:常用的DNA 浓度及纯度检测方法有哪些?
称答:非大提柱式植物 DNAout4次图片回收得到的DNA 可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。琼脂糖凝胶电泳通过对比定量的Marker 来定量浓度;紫外分光检测OD260/280 比值,OD260/280 比值在1.7-1.9 之间说明所得 DNA 纯度较好,如果洗脱时不使用溶液Eluent而使用去离子水,比值会偏低,因为pH 值和离子存在会影响光吸收值,但不表示纯度低。
问:长段回收时应注意哪些问题?
答:当DNA段长度较长(5 kb 以上)时,回收效率会有所下降,这是DNA 切胶回收时的常见现象。此时建议按以下方法解决问题:
1 适当增加待回收DNA 样品的点样量;
2 由于长段DNA 不易从树脂上洗脱下来,建议洗脱两次,可以提高洗脱效率;
3 减少操作过程中对长段DNA 的物理损伤,如混合振荡操作不要过于剧烈,切胶时不要将DNA 长时间暴露在紫外等下。
非大提柱式植物 DNAout4次图片注意事项:
●溶液PE *次使用前请按瓶上标签加入4 倍体积的无水乙醇,即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 无水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 无水乙醇,使用后立即盖紧盖子。
● 本产品对电泳使用的Agarose 种类没有严格限制,可以使用普通Agarose 。为了保证回收DNA 的质量和DNA 回收效率,希望使用高纯度的Agarose ,但没有必要一定要使用低熔点的Agarose 等。
● 电泳时请使用新鲜配制的TAE 电泳缓冲液,以免影响电泳及回收效果。
● 请适当延长电泳时间,在条带分离清晰后进行切胶回收,以免回收到多余杂带。
● 为提高DNA 回收收率,切胶时应尽量除去多余的胶块。
● 本试剂盒纯化柱的DNA 吸附能力强。但如果DNA 浓度小,或DNA 初始量少,回收率将会偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA 段可直接用于各种酶促反应等,不会影响后续试验。
● 为了保证回收效率,请不要使用未调整pH 值的超纯水洗脱目的段。
● 请严格按照操作步骤操作。丁香酸 530-57-4
特戊酸碘甲酯 53064-79-2
5-氯-2-甲基苯酚 5306-98-9
2,4-二甲基-1,3-噻唑-5-羧酸 53137-27-2
雌酚酮 53-16-7
二苯酮缩亚胺盐酸盐/二苯甲酮亚胺盐酸盐 5319-67-5
N-苄 5321-63-1
5-氨基-2-甲氧基-3-溴吡啶 53242-18-5
2-溴乙基膦酸二乙酯 5324-30-1
N-BOC-氨基环己胺羧酸 53292-89-0
三氨基胍盐酸盐 5329-29-3
4-溴丙烯酸酯 5332/6/9
3-溴喹啉 5332-24-1 CT-1/CTF1 心肌营养素1抗体
CLEC2/CLEC1B C型凝集素结构域家族1成员B抗体
CATSPERB 阳离子通道精子相关蛋白β亚基抗体
CEP57 睾丸特异性蛋白57抗体
CD62L L选择素抗体
CD53 CD53抗体
CED6 细胞死亡同源蛋白6抗体
CLCNKB 氯离子通道KB抗体
CLEC12A C型凝集素结构域家族12成员A抗体
CLIC2 氯离子通道蛋白2抗体
CLEC9A C型凝集素结构域家族9成员A抗体
CLEC9A C型凝集素结构域家族9成员A抗体
CDH12 脑钙粘蛋白12抗体
Cadherin 20 钙粘蛋白20抗体
CDH29 钙粘蛋白29抗体
CD200R CD200受体抗体
Cadherin 26 钙粘蛋白26抗体
CDHF14 钙粘蛋白14抗体
CLCA3 钙激活氯离子通道蛋白3抗体
2-辛基十二醇 5333-42-6
2,3-环戊烯并吡啶 533-37-9
非大提柱式植物 DNAout4次图片3-甲基-4-硝基吡唑 5334-39-4
2-脱氧-D-核糖 533-67-5
3-(三氟甲氧基) 50823-91-1
操作步骤:
1 非大提柱式植物 DNAout4次图片切取含有目的DNA段的琼脂糖凝胶条带。
● 尽量切除不含有目的DNA 部分的凝胶,减少凝胶体积,提高DNA 回收率。
● 切胶时,请使用长波长UV (360 nm )光盒。且不要将DNA 长时间暴露在紫外灯下,以防DNA 损伤。
2 称取凝胶的重量近似地确定其体积。
● 凝胶重量的称量方法:取1.5 ml 离心管电子天平称初质量,切胶装在离心管后称终质量,两者差即为胶的质量。不同离心管的重量可能有差异,因此,每个离心管的重量需单独称量。
3 按照每100 mg 琼脂糖凝胶对应100 µl 溶液BD 的比例,向离心管中加入溶液BD。
4 50 ℃水浴7-10min,直至凝胶*溶化。期间需要振荡混合3 次。
● 琼脂糖必须*融化,以免堵塞柱子,严重影响DN段的回收效率。
● 如果总体积大于500 µl,可适当增加溶胶时间。
● 若此时溶液变红,可加10 µl 3M NaAC (pH 5.2)。
5 将步骤4 所获溶液置于DNA 纯化柱中,静置2min 。
● 胶块*溶解后将胶溶液温度降至室温再上柱,因为纯化柱在较高温度时结合DNA 的能力较弱。
6 12,000 rpm 离心1min。若溶液量大于DNA 纯化柱的容积,可分两次离心,弃滤液。
● 此时DNA 片段被吸附于DNA 纯化柱中的硅胶膜上。
7 加入500 µl 溶液BD。12,000 rpm, 离心1min,弃滤液
8 加入500 µl 溶液PE。12,000 rpm, 离心1min,弃滤液。
● 溶液PE 初次使用前用无水乙醇按1: 4 稀释,即含80% 乙醇。
● 此步骤的作用是将硅胶膜上吸附的蛋白、盐等杂质洗脱,以获得高质量DNA 片段。
9 加入500 µl 溶液PE。12,000 rpm, 离心1min,弃滤液。
10 12,000 rpm 离心 3min ,以*去除纯化柱中的液体。
● 此步骤的作用是去除残留乙醇,避免残留乙醇影响后续酶促反应。同时也利于DNA 片段的充分溶解。
11 将离心柱置于新的1.5 ml 离心管中。向纯化柱的中央处,悬空滴加30-100 µl 溶液Eluent (60℃预热),静置2min 。12,000 rpm 离心1min,管底即为目的DNA 片段。贮存于-20℃。
● 溶液Eluent 可用无菌双蒸水代替,但其pH 需为8.0-8.5,加入体积视DNA 目的片段的多少、用户对目的片段浓度要求而定。
● 对溶液Eluent 60℃预热,会提高提取DNA 目的片段的产量。CD200R CD200受体抗体
CELA1 弹性蛋白酶1抗体
c-Kit 干细胞生长因子受体/细胞表面分化抗原抗体抗体
CD99L2 CD99样蛋白2抗体
CTNNA3 钙粘蛋白相关蛋白CTNNA3抗体
Claudin 15 紧密连接蛋白15抗体
Claudin 12 紧密连接蛋白12抗体
CHIC2 CHIC2蛋白抗体
phospho-CHEK1 磷酸化细胞周期检测点激酶1抗体
Phospho-CHK2 磷酸化细胞周期检测点激酶2抗体
Phospho-CHK2 磷酸化细胞周期检测点激酶2抗体