10%SDS-PAGE凝胶超快速配制试剂盒
时间:2020-05-07 阅读:528
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金克隆(北京)生物技术有限公司 -
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528次GoldView II核酸染料说明书
货号:AA0112
规格:0.5ml (5000×)
保存:-20℃,短期4℃保存。
注意:本产品属于微量核酸检测试剂,使用时请严格按照说明书操作初次使用前请融化后离心再开封。
产品简介:
GoldView II是一种可代替溴化乙锭(EB)的新型花青类核酸染料,采用琼脂糖电泳检测DNA时,GoldView II与核酸结合后能产生很强的荧光信号,其灵敏度比EB强5-10倍。GoldView II与核酸结合后,吸收峰为497nm,另外,其在254nm处也有一强吸收峰,发射波长为520nm,在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光,而且也可用于染RNA。通过Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验,致突变性结果均为阴性;而溴化乙锭(EB)是一种强致癌剂。因此用Goldview II代替EB不失为一种明智的选择。
本产品为DMSO溶解,低温时为固体状态,温度到达20℃以上即可融化。
使用方法(仅供参考):
*使用泡染和点染法。
泡染:
1.常规方法制备不含任何染料的琼脂糖凝胶。
2.上样,电泳后将胶放入经TAE稀释2000倍的染料中浸泡30分钟即可。
点染:
点染方法成本更低,同时适用于凝胶回收。
1. 常规方法制备不含任何染料的琼脂糖凝胶。
2. 用3×Loading Buffer将本产品稀释500-1000倍,现用现配。
3. 取稀释后的染料2μl与5μl样本混匀后上样即可。
胶染(不建议使用):
由于GoldView II敏感度比EB高数倍,使用时,需将商品化的Marker用1×DNA Loading Buffer作5-10倍的稀释,上样1-10μl,以得到较好的结果(通常稀释10倍后上样5ul)。对于待检测样品,通常仅需1-2μl即可。如果待测样品浓度较高,也须作一定倍数稀释,否则会造成条带不整,影响迁移速率。凝胶回收请选择点染方法。
1. 将50ml琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为0.8%~2%)在微波炉中融化。
2. 冷却至不烫手时加入10-15μl GoldView II (不能少于10ul),轻轻摇匀,避免产生气泡。
3. 倒胶,待琼脂糖凝胶*凝固后上样电泳。
4. 电泳完毕在紫外灯下观察。若使用数码相机照像记录,则关闭相机的闪光灯,放在自动档即可;若使用凝胶成像系统照相,通过调节光圈、曝光时间,选择合适的滤光片,可得到成像清晰的照片。
注意事项:
1. 胶厚度不宜超过0.5cm,胶太厚会影响检测的灵敏度。
2.虽然未发现GoldView II有致癌作用,但其由DMSO溶解,对皮肤、眼睛会有一定的刺激,操作时应戴上手套。