CM离子交换色谱填料SepFast HighRes Plus产品特性
时间:2023-04-13 阅读:593
1.简介
CM离子交换色谱填料SepFast HighRes Plus是一组弱阳离子交换色谱填料。结合容量和结合动力学高于IEX SepFast HighRes。由于CM离子交换色谱填料SepFast HighRes Plus具有高分辨率和高载量,特别适用于需要以高通量和高成本效益的方式纯化困难分子的过程。
CM离子交换色谱填料SepFast HighRes Plus采用平衡设计,可提供高分辨率和高载量,以分离生物工艺应用中的类似成分。核心优势是:
·高流速下的高样品载量
·高载量下的高分辨率
基础基质基质由高度交联的琼脂糖和葡聚糖制成,具有优异的流动性。它对生物加工行业中遇到的大多数化学条件都非常稳定。
2. 产品特性
表1 CM SepFast HighRes Plus的特性
CM SepFast HighRes Plus | |
基质 | 葡聚糖接枝高度交联琼脂糖 |
功能配体 | 羧甲基弱阳离子 |
总离子容量 | 0.08-0.13 mmol/ml |
动态结合容量* | >130 mg lysozyme/ml |
粒径 | 20 - 50 µm |
压力-流速特性** | 推荐30-150 cm/hr |
操作压力 | Up to 3 bar |
pH稳定性 | 2-14 (短期),4-12 (长期) |
工作温度 | 4℃-30℃ |
化学稳定性 | 所有常用的缓冲液;1 M乙酸、1 M NaOH、6 M盐酸胍、8 M 尿素、30% 异丙醇、70% 乙醇 |
注意事项 | 避免氧化剂和阳离子洗涤剂 |
保存 | 20% 乙醇 |
*测试条件:10 mM缓冲液 pH 7.5,上样5 mg/ml 蛋白质,停留时间5分钟,50%穿透。
3.方法优化
建议在载量、流速、结合pH值、结合离子强度、洗脱速度和梯度等参数之间进行筛选。由于CM离子交换色谱填料SepFast HighRes Plus的快速孔隙可及性,结合步骤可以在比洗脱步骤更快的流速下完成。建议特别注意优化洗脱条件以获得最佳分离能力。
强离子交换色谱填料可以在较宽的pH范围内保持其电荷(并因此保持其功能),而弱离子交换色谱填料的离解程度和离子交换容量随pH值而变化。因此,如果使用弱离子交换色谱填料,优化pH值更为关键。
通常在优化方法时,平衡组分分离度与工艺产量是主要考虑因素。此外,对于不稳定或对剪切力敏感分子的纯化,需要优化操作条件以平衡产量和对目标分子可能造成的损害。
4.装柱
CM离子交换色谱填料SepFast HighRes Plus由高度交联的珠状琼脂糖制成,具有出色的机械强度。CM离子交换色谱填料SepFast HighRes Plus可以很容易地以任何可能的填充方式填充到任何类型的色谱柱中。典型的包装压力高达3 bar。
5.保养
根据不同的应用,色谱填料可能会被多次使用。如需重复使用,请参阅以下说明。
(1)再生
每次运行后,用高离子强度溶液(例如1M NaCl缓冲液)或增加pH 值。
(2)就地清洗 (CIP)
CIP是一种去除强结合物质的程序,例如再生后残留在吸附剂表面的脂质、内毒素和变性蛋白质。定期 CIP 可防止污染物在填充床中积聚,并有助于保持色谱柱性能。
应根据存在的污染物类型为每个过程制定具体的 CIP程序。CIP 的频率取决于各个应用的性质。
以下信息可作为一般指导:浓度高达2 M的盐可用于清除因离子相互作用而结合的杂质。疏水性结合的污染物可以通过以下试剂去除:1 M NaOH、低比例的非离子洗涤剂(例如0.1-2%)、碱性或酸性条件下的30% 异丙醇(例如在乙酸或磷酸存在下)。也可以探索上述试剂的组合。一般来说,孵育时间应该更长(例如从 30 min到2 h),以确保污染物WAN全解离。
(3)消毒
建议使用0.5‑1.0 M NaOH接触1 h进行消毒。
6.储存
CM离子交换色谱填料SepFast HighRes Plus应储存在20%乙醇中(强阳离子交换色谱填料含有0.2 M NaAC)以防止微生物生长。CM离子交换色谱填料SepFast HighRes Plus存储在4℃到30℃的温度下。使用前,用至少5倍体积的运行缓冲液来平衡色谱填料。
7.更多信息
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8.订购信息
产品 | 规格 | 货号 |
CM SepFast 6HF | 25 ml | 452301-25ML |
100 ml | 452301-100ML | |
500 ml | 452301-500ML | |
1 litre | 452301-1L | |
5 litre | 452301-5L | |
10 litre | 452301-10L | |
CM SepFast 6HF Plus | 25 ml | 453301-25ML |
100 ml | 453301-100ML | |
500 ml | 453301-500ML | |
1 litre | 453301-1L | |
5 litre | 453301-5L | |
10 litre | 453301-10L | |
CM SepFast Large Bead | 25 ml | 440701-25ML |
100 ml | 440701-100ML | |
500 ml | 440701-500ML | |
1 litre | 440701-1L | |
5 litre | 440701-5L | |
10 litre | 440701-10L | |
CM SepFast Large Bead Plus | 25 ml | 440801-25ML |
100 ml | 440801-100ML | |
500 ml | 440801-500ML | |
1 litre | 440801-1L | |
5 litre | 440801-5L | |
10 litre | 440801-10L | |
CM SepFast HighRes | 25 ml | 471101-25ML |
100 ml | 471101-100ML | |
500 ml | 471101-500ML | |
1 litre | 471101-1L | |
5 litre | 471101-5L | |
10 litre | 471101-10L | |
CM SepFast HighRes Plus | 25 ml | 471201-25ML |
100 ml | 471201-100ML | |
500 ml | 471201-500ML | |
1 L | 471201-1L | |
5 L | 471201-5L | |
10 L | 471201-10L |