1.简介

DEAE 离子交换色谱填料SepFast HighRes是一组弱阴离子交换色谱填料。DEAE 离子交换色谱填料SepFast HighRes专为生物分子的高分辨率纯化而设计，其中不纯的成分很难通过普通的生物处理色谱填料分离。

DEAE 离子交换色谱填料SepFast HighRes在配体密度、负载量和单个组分的分离能力之间进行了平衡设计，适用于大规模生物制造应用。

DEAE 离子交换色谱填料SepFast HighRes的基础基质由高度交联的较小尺寸(20 - 50 µm)的琼脂糖珠制成，具有出色的流动性。它对生物加工行业中遇到的大多数化学条件都非常稳定。

2. 产品特性

表1  DEAE SepFast HighRes的特性

*测试条件：10  mM缓冲液 pH  7.5，上样5 mg/ml 蛋白质，停留时间5分钟，50%穿透。

3.方法优化

建议在载量、流速、结合pH值、结合离子强度、洗脱速度和梯度等参数之间进行筛选。由于DEAE 离子交换色谱填料SepFast HighRes的快速孔隙可及性，结合步骤可以在比洗脱步骤更快的流速下完成。建议特别注意优化洗脱条件以获得最佳分离能力。

强离子交换色谱填料可以在较宽的pH范围内保持其电荷（并因此保持其功能），而弱离子交换色谱填料的离解程度和离子交换容量随pH值而变化。因此，如果使用弱离子交换色谱填料，优化pH值更为关键。

通常在优化方法时，平衡组分分离度与工艺产量是主要考虑因素。此外，对于不稳定或对剪切力敏感分子的纯化，需要优化操作条件以平衡产量和对目标分子可能造成的损害。

4.装柱

DEAE 离子交换色谱填料SepFast HighRes由高度交联的珠状琼脂糖制成，具有出色的机械强度。该色谱填料可以很容易地以任何可能的填充方式填充到任何类型的色谱柱中。典型的包装压力高达3 bar。

5.保养

根据不同的应用，色谱填料可能会被多次使用。如需重复使用，请参阅以下说明。

（1）再生

每次运行后，用高离子强度溶液（例如1M NaCl缓冲液）或增加pH 值。

（2）就地清洗  (CIP)

CIP是一种去除强结合物质的程序，例如再生后残留在吸附剂表面的脂质、内毒素和变性蛋白质。定期 CIP 可防止污染物在填充床中积聚，并有助于保持色谱柱性能。

应根据存在的污染物类型为每个过程制定具体的 CIP程序。CIP 的频率取决于各个应用的性质。

以下信息可作为一般指导：浓度高达2 M的盐可用于清除因离子相互作用而结合的杂质。疏水性结合的污染物可以通过以下试剂去除：1 M NaOH、低比例的非离子洗涤剂（例如0.1-2%）、碱性或酸性条件下的30%  异丙醇（例如在乙酸或磷酸存在下）。也可以探索上述试剂的组合。一般来说，孵育时间应该更长（例如从 30 min到2 h），以确保污染物WAN全解离。

（3）消毒

建议使用0.5‑1.0 M NaOH接触1 h进行消毒。

6.储存

DEAE 离子交换色谱填料SepFast HighRes应储存在20%乙醇中（强阳离子交换色谱填料含有0.2 M NaAC）以防止微生物生长。将色谱填料存储在4℃到30℃的温度下。使用前，用至少5体积的运行缓冲液来平衡色谱填料。

7.更多信息

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8.订购信息