常见细胞实验原理一文get!
时间:2024-10-08 阅读:467
一、细胞周期检测
1.概念
细胞周期是指细胞从上一次分裂完成开始,到下一次分裂完成时为止,包括两个阶段:分裂间期和分裂期。细胞周期检测的是单个细胞的增殖速度,通过缩时摄影来测定。
2.原理
细胞在不同的时期,细胞所含的DNA量不同。正常细胞的二倍体含量通常为2N,则在G/G1期,细胞的DNA量为2N,而G2/M期细胞DNA含量为4N。S期DNA量为2N—4N。碘化丙锭(PI)可以与细胞内的DNA和RNA结合,通过RNA酶将RNA消化后,检测到与DNA结合的PI荧光强度可以直接反映细胞内DNA含量的多少。因此,采用流式细胞术PI染色法检测细胞内DNA含量时,可将细胞周期分为G/G1期、S期和G2/M期,并通过特殊软件计算各时相的百分比。
细胞周期检测结果展示
二、细胞克隆实验
1. 概念
细胞克隆,又称为细胞集落,指的是单个细胞在体外增殖6代以上,其后代所形成的细胞群体。细胞克隆实验的目的是检测细胞的增殖能力、细胞侵袭性、对杀伤因素敏感性等项目的重要技术方法。
2.原理
接种细胞后,只有同时具有贴壁和增殖活力的细胞才会形成克隆。克隆形成率反映细胞的独立生存能力的强弱,用于评价细胞群体依赖性和增殖能力。克隆形成率与接种密度有一定关系,在进行测定时需要将接种的单个细胞分散为悬液,并直接接种在培养皿中进行持续一周以上的培养,并在此期间进行检查。当出现新的、由单个原始生长出来的完整几何结构时,则可以停止培养过程。
细胞克隆结果展示
三、细胞凋亡实验
1.概念
细胞凋亡是指细胞在一定的生理或病理条件下,受内在遗传机制控制,按照自身程序主动性、生理性的死亡过程。细胞凋亡受凋亡相关基因调控,故又称为程序性细胞死亡。
2.原理
一般而言,细胞凋亡的早期主要涉及胞内一些蛋白质的变化,如蛋白质量的增加、位置的转移、状态的改变等,还有一些磷脂和Ca2+含量的变化;中晚期则伴随着DNA断裂和凋亡小体的形成;而整个凋亡过程中细胞形态也会发生改变。
四、细胞侵袭实验
1.概念
细胞侵袭实验是将细胞小室(Transwell小室)放入培养板中,上室(细胞小室)内盛装上层培养液,下室(培养板)内盛装下层培养液,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。将细胞种在上室内,由于聚碳酸酯膜的通透性,下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞,从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。
2.原理
细胞侵袭指细胞在原位突破基底膜,然后内渗进入血管、淋巴管的过程。
细胞侵袭结果展示
五、细胞迁移实验
1. 概念
细胞迁又称为细胞移动、细胞爬行或细胞运动,是指细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的梯度后而产生的移动。
2. 原理
细胞迁移实验是测定细胞迁移运动与修复能力的方法,类似体外伤口愈合模型。在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上,用微量枪头或其他硬物在细胞生长的中央区域划线,去除中央部分的细胞,然后继续培养细胞至实验设定的时间,取出细胞培养板,观察周边细胞是否生长至中央划痕区,以此判断细胞的生长迁移能力,实验通常需设定正常对照组和实验组,实验组是加了某种处理因素或药物、外源性基因等组别,通过不同分组之间的细胞对于划痕区的修复能力,可以判断各组细胞的迁移与修复能力。
细胞迁移实验结果展示
更多有关常见细胞实验的文章,请咨询细胞产品供应商——北京百奥创新科技有限公司!