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产品名称:线粒体柠檬酸(MCA)含量紫外分光光度法
规格:50管/48样
测试方法:紫外分光光度法
分类:三羧酸循环系列
货号:GOY-01S6584
客户自备仪器和试剂
商品介绍:
测定意义 CA是线粒体三羧酸循环的第一个中间产物,由柠檬酸合酶催化乙酰CoA与草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循环强度的主要指标之一。 配合测定丙酮酸含量、丙酮酸脱氢酶活性、乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量,其中(1)丙酮酸含量和丙酮酸脱氢酶活性变化可以反映糖酵解进行程度,(2)综合分析丙酮酸含量、丙酮酸脱氢酶活性和乙酰CoA含量变化可以反映脂肪酸β-氧化途径提供的乙酰CoA情况,(3)乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量变化可以反映三羧酸循环进行状况。 测定原理: CA在柠檬酸裂解酶的作用下,生成α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性条件下,α-酮酸进一步与苯肼反应,生成相应的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在330nm处有吸收峰,该波长下吸光度的变化程度可反映出CA的含量。 自备仪器和用品: 可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL石英比色皿、研钵和蒸馏水。 |
实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
特点: 1、优化设计的实验方案,1小时即可完成 2、灵敏度高,操作便捷 3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂 | 仪器: 1、分光光度计/酶标仪(比色测定波长为550nm) 2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃) 3、台式离心机 4、漩涡混匀器 5、微量移液器 |
样品测定的准备:
1、细胞、细菌或组织样品的制备 :
细菌或细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,弃上清;按照每100万细菌或细胞加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3秒,间隔10秒,重复30次),之后置沸水浴振荡提取10min;10000g,常温离心10min,取上清,冷却后待测。
组织:称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆;之后置沸水浴振荡提取10min,10000g,常温离心10min,取上清,冷却后待测。
2、血清(浆)样品:取100μL血清(浆)加入1mL提取液,充分混匀,之后置沸水浴振荡提取10分钟,10000g,常温离心10分钟,取上清,冷却后待测。
3、标准品的处理:称取1mg,将标准品稀释为15、10、8、6、4、2、1、0 μg/ml。
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不浓度的标准品50μL;
3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
小鼠热休克蛋白60(Hsp-60)试剂盒培养板,二水 99.99% metals basis(剧品)假单胞菌 95%
小鼠绒毛膜促性腺激素(CG)试剂盒培养板三氧化钨 SP尼日利亚菌素钠 98%
小鼠绒毛膜促性腺激素(CG)试剂盒标板 u型碲 SP寡霉素A 95%
小鼠二(MDA)试剂盒平底标板钨 99.99% metals basis寡霉素B 80%
小鼠二(MDA)试剂盒v型软板钒粉 99.9% metals basis,100-200 mesh赭曲素A 98%
小鼠超氧化物歧化(SOD)试剂盒培养板水质钒标样 995 - 1005 ug/ml V(3+) 的 2% HNO3溶液 (20°C)氨核苷嘌呤霉素 98%
小鼠超氧化物歧化(SOD)试剂盒培养板五二钒 99.99% metals basis(剧品)根赤壳菌素 98%
小鼠C肽(C-Peptide)试剂盒 方形培养皿氧化钇 SP星形孢菌素 98%
小鼠C肽(C-Peptide)试剂盒 样品杯硝氧锆 水合物 SP柄曲菌素 98%
小鼠热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)试剂盒样品杯(带匙)硝氧锆 水合物 99.99% metals basis柄曲菌素 分析标准品
小鼠热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)试剂盒采便器氧化锌 SP链黑霉素 98%
小鼠血清总补体(CH50)试剂盒采便器锌粉 SP衣霉素 98%
小鼠血清总补体(CH50)试剂盒采便器锌粒 SP硫藤黄素 95%
小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)试剂盒样品杯硫代乙 98%缬氨霉素 ≥98% (TLC), ≥95% (HPLC), solid
小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)试剂盒样品杯硫代乙 95%蛎灰菌素A 95%
小鼠胰岛素(INS)试剂盒样品杯(带匙)氨苄青霉素,三水 分析标准品渥曼青霉素 98%
线粒体柠檬酸(MCA)含量紫外分光光度法猴过氧化物体增殖激活物受体γ辅激活因子1α(PPARγC1α)联免疫吸附测定试剂盒硫铝无二柠檬杆菌拉丁属名: Fusarium equiseti
猴活化蛋白C(APC)联免疫吸附测定试剂盒 氮化木贼镰孢菌拉丁属名: Lentinula edodes
猴甘肽/甘素(GAL)联免疫吸附测定试剂盒 氮化香菇拉丁属名: Haemophilus influenzae Type b
猴血管紧张素I受体抗体(ANG I R-Ab)联免疫吸附测定试剂盒 Cobicistat (GS-9350)ATCC 10211注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
猴细丝蛋白Cγ(FLNC)联免疫吸附测定试剂盒2,6-二-γ-吡喃斜顶菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
猴磷烯式羧激1(PCK1)联免疫吸附测定试剂盒2,6-二-γ-吡喃相思根瘤菌拉丁属名: Variovorax boronicumulans
猴抗胶原蛋白抗体(CLA)联免疫吸附测定试剂盒 2,6-二-γ-吡喃聚贪氏菌拉丁属名: Bacillus subtilis
猴泛素蛋白D(UBD)联免疫吸附测定试剂盒柄曲菌素枯草芽孢杆菌拉丁属名: Nocardioides plantarum
猴色氨酰tRNA合成(WARS)联免疫吸附测定试剂盒柄曲菌素Nocardioides拉丁属名: Leclercia adecarboxylata
猴IgA Fc片段受体(FcaR)联免疫吸附测定试剂盒磷氢钡非脱羧勒克菌拉丁属名: Bacillus subtilis
猴成纤维生长因子21(FGF21)联免疫吸附测定试剂盒磷氢钡枯草芽孢杆菌拉丁属名: Beauveria bassiana
猴白调节素(LR)联免疫吸附测定试剂盒 无水化铬(Ⅱ)球孢白僵菌拉丁属名: Sporobolomyces salmonicolor
猴血管内皮生长因子受体3(VEGFR3/Flt4)联免疫吸附测定试剂盒2-溴-4-吡啶赭色掷孢酵母拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
猴晚期糖化终末产物受体(AGER)联免疫吸附测定试剂盒 2-溴-4-吡啶酿酒酵母注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
猴丝氨蛋白(PRSS)联免疫吸附测定试剂盒 硫代苯酯美澳型核果褐腐病菌拉丁属名: Agrococcus jenensis
猴黑素转铁蛋白(MFI2)联免疫吸附测定试剂盒硫代苯酯耶纳农球菌拉丁属名: Bacillus subtilis