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研究发现牛凝血酶提高PCR的效率和特异性

时间:2018-03-23      阅读:159

    研究人员发现,牛凝血酶(BT)在防止引物二聚体形成和增强PCR产物形成上极为有效。

    PCR是许多领域的核心技术之一,比如疾病诊断和法医鉴定。尽管这种技术被广泛使用,但有时还是困难重重,特别是在扩增低拷贝、富含GC或复杂的样品时。随着新技术的发展,PCR也面临新的问题。例如,在适体(aptamer)的选择过程中观察到PCR偏向,而纳米材料的使用虽然能大幅提高PCR的特异性或灵敏度,但也可能抑制PCR。

    为了解决这些问题,人们开始采用各种PCR添加剂和增强剂来提高PCR的产量、特异性和一致性。凝血酶是一种*的丝氨酸蛋白酶,可将可溶性纤维蛋白原转化为不可溶的纤维蛋白,并催化其他许多与凝血相关的反应。在这项研究中,研究人员发现牛凝血酶作为一种通用 的PCR增强剂相当有效。

    研究人员通过多个种类的样品来证明牛凝血酶的PCR增强效果,包括低拷贝的合成单链DNA(ssDNA)、合成的ssDNA库、人类基因组DNA和乙型肝炎病毒基因组DNA。他们发现,在牛凝血酶存在时,引物二聚体条带全部消失,而PCR产物的产量明显增加。同时,牛凝血酶也能提高复杂样品的PCR效率,比如存在高浓度的无关DNA分子时。

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