沪鼎浅谈:ELISA试剂盒实验显色淡的原因及解决方法
时间:2018-01-05 阅读:373
近日,我公司技术人员在处理售后的过程中,有客户致电咨询ELISA实验显色淡的原因及解决方法,随后技术人员为其寻找原因并解决问题,问题解决之后,我公司技术人员将具体内容整理出来,在这里分享给大家。
可能原因:
1.试剂盒在运输途中时间太长,温度太高;
2.试剂盒未充分平衡;
3.培养箱温度不足37℃;
4.保温时间不足;
5.洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加;
6.移液器吸液量不足,吸嘴内壁挂水太多或内壁不清洁;
7.蒸馏水水质有问题;
8.底物作用时间不足。
解决方法:
1.尽量缩短运输时间,夏季应放冰块降温;
2.试剂盒从2~8℃冰箱取出后打开盒盖,于室温平衡至少20分钟,确保所有试剂已平衡至室温(约25℃);
3.注意培养箱温度,放入反应板后尽量减少开启次数以免影响温度恒定,非隔水式培养箱尤其应注意;
4.校正定时钟准确定时;
5.按说明书要求保留洗涤时间,准确记住洗涤次数;
6.校正移液器,吸嘴要配套,装吸嘴时要紧密,吸嘴内壁要清洁,一次性使用;
7.使用新鲜合格的蒸馏水;
8.准确定时。
另外还有一个相关重点问题值得讨论,上海沪鼎技术员特别说明:①显色一定要控制时间,根据试剂盒说明操作即可。一般来说,显色时间过短,结果偏低;②显色时间过长,空白增高或者非特异性显色增加。
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