上海沪鼎生物科技有限公司

化工仪器网免费会员

收藏

沪鼎解析——ELISA试剂盒的保温秘诀

时间:2018-01-19      阅读:343

  据公司杨的统计,由于临近新年,近期为年后预购ELISA试剂盒实验而订购产品的客户也在逐渐的增加。产品的使用也应当注意,由zui近两周的温度显示忽高忽低,在这温度不定的新年时节里,ELISA试剂盒的保温要如何做好呢?上海沪鼎有秘诀,快来看看吧!

 

一、什么是ELISA保温
    在ELISA试剂盒中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需
要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育,有人称之为孵育,在ELISA试剂盒中似不恰当。

 

二、为什么ELISA反应需要保温?
    ELISA属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,加
入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有zui贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育。

 

三、多少温度才适宜?
    温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数
抗原抗体结合的合适温度。在建立ELISA方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经1~2小时,产物的生成可达。为加速反应,可提高反应的温度,有些试验在43℃进行,但不宜采用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为*,在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜,以形成zui多的沉淀。但因所需时间太长,在ELISA试剂盒中一般不予采用。

 

四、保温方式
    除有的ELISA仪器附有特制的电热块外,一般均采用水浴,可将ELISA试剂盒板置于水浴箱中,
ELISA板底应贴着水面,使温度迅速平衡。为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,此时可让反应板漂浮在水面上。若用保温箱,ELISA试剂盒应放在湿盒内,湿盒要选用传热性良好的材料如金属等,在盒底垫湿的纱布,zui后将ELISA板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度,特别是在气温较低的时候更应如此。无论是水浴还是湿盒温育,反应板均不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。室温温育的反应,操作时的室温应严格限制在规定的范围内,标准室温温度是指20~25℃,但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。

    室温温育时,ELISA试剂盒只要平置于操作台上即可。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。为保证这一点,一个人操作时,一次不宜多于两块板同时测定。

 

  上海沪鼎生物科技有限公司是一家集科研和生产为一体的专业化生物企业,产品国内大部分地区,销售额逐年稳步提高,拥有雄厚的实力、合理的价格和优良的服务,能够及时解决和满足客户的各方面的需求,与国内多家科研机构、企业、高校建立了良好的长期合作关系。

上一篇: 这十要素的掌握,让您做ELISA实验 下一篇: 上海沪鼎:避免ELISA洗板产生气泡的方法
提示

请选择您要拨打的电话: