就在前不久，我公司杨收到一位客户对实验的咨询留言。这位客户说道：“初次做间接ELISA，做了几次结果都没有显色，原因在哪里呢”

    收到留言后，杨为客户安排技术去。针对问题描述，上海沪鼎技术人员分析出为何间接ELISA没有显色，可能原因有这几个方面：

    1.包被原：包括您的包被液有无问题，有没有配错。包被原一般加100微升，37度2小时；

    2.封闭：封闭液用的是否适合？您说做了几次都没显色，空白孔也不显吗？如果空白也无颜色，那封闭就没有问题。一般封闭是200微升每孔，也可以满孔封闭

    3.一抗：检查您的一抗是否失效。是否是在37度反应

    4.二抗：底物，底物缓冲液……这些都要好好检查！

    5.洗涤：用PBST洗涤，包被和封闭时洗板3次；一抗二抗洗涤5次，每次间隔3分钟。

    手工和机器洗涤没什么不同，就是省力一些。洗5次不会有负影响，在一抗和二抗洗涤过程中，恰恰需要多洗几次，这样有助于减少非特异性吸附。

希望以上文献汇总能给您的ELISA实验带来帮助，欢迎科研朋友咨询、提出意见，愿我们的努力成果与您的科研碰撞出不一样的火花！

  上海沪鼎生物科技有限公司主营：Elisa试剂盒,人Elisa试剂盒,大鼠Elisa试剂盒,小鼠Elisa试剂盒,生物试剂,血清,抗体,培养基,标准品,国产血清、GIBCO胎牛血清等。种属齐全，*。期待您的与合作！