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科研指南:ELISA试剂盒标本处理的技术问题

时间:2018-03-01      阅读:226

  在ELISA检测实验中,检测标本是影响实验结果的关键因素之一。今天上海沪鼎为您分享的内容是ELISA检测试剂盒标本处理过程中的技术问题,希望可以给您的ELISA试剂盒实验带来帮助。

一、标本溶血
由于各种人为原因引起的标本溶血,均可因红细胞破坏溶解时释放出大量具有过氧化物酶活性
的血红蛋白,在以辣根过氧化物酶为标记的ELISA测定中,会导致非特异性显色,ELISA试剂盒干扰测定结果。为克服上述干扰作用,标本采集时必须注意避免溶血。

 

二、标本受细菌污染

因菌体中可能含有内源性辣根过氧化物酶,因此,被细菌污染的标本同溶血标本一样,亦可产生非特异性显色而干扰测定结果。


三、标本保存不当
在冰箱中保存过久的标本,血清中IgG可聚合成多聚体、AFP可形成二聚体,在间接法ELISA测定
中会导致本底过深、甚至造成假阳性;标本放置时间过长(如一天以上),有时抗原或抗体免疫活性减弱,亦可出现假阴性。为克服上述干扰,ELISA测定的血清标本宜为新鲜采集;如不能立即测定,5天内测定的血清标本可存放于4℃,ELISA试剂盒1周后测定的血清标本应低温冻存;冻存后融解的标本,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混合后再测定,但混匀时应轻柔,不可强烈振荡。

 

四、标本管中添加物质的影响
抗凝剂、酶抑制剂及快速分离血清的分离胶等均对ELISA测定有一定干扰作用。

 

  上海沪鼎是一家专业从事“产品研发生产、市场销售、技术服务”为一体的高科技生物技术公司,公司生产的产品质量有保证,含量高,能够给实验带来准确的结果。如有需要可我司销售人员,我们将竭诚为您服务。

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