1. 中和缓冲液的作用原理：

中和缓冲液的基本原理是利用某些化合物成分可与消毒剂发生化学反应，生成的中和产物对受试微生物无害、不影响消毒或灭菌效果的检测与判断，或与消毒剂发生吸附、乳化作用而终止消毒剂对微生物的抑制和杀灭作用。

2. 有效中和剂应该具备条件：

1）快速有效去除残留的消毒剂；

2）中和缓冲液与中和产物不影响微生物的生长繁殖；

3）中和缓冲液不会破坏培养基的营养成分，亦不影响其物理性状。

3. 常用中和缓冲液

吐温80

吐温 80与卵磷脂经常以复配形式组成中和缓冲液，两者均属于表面活性剂，有抗氧化作用，可有效清除消毒剂中吸附力较强的非离子型活性物质。对酚类、季铵盐类、醇类、表面活性剂、醋酸等消毒剂具有很好的中和作用。

甘氨酸

甘氨酸属于两性活性物质，具有抗氧化作用，其与各种非离子型活性物有良好的相溶性，因此能有效清除消毒剂中的非离子型活性物，甘氨酸是良好的醛类中和剂。

硫代硫酸钠

硫代硫酸钠具有强还原性，能与过氧乙酸等氧化物质发生迅速的化学反应，使其失去氧化性，从而清除消毒剂对微生物的有害性，硫代硫酸钠可有效去除过氧化物类消毒剂如氟、氯、溴、碘等卤素类消毒剂的杀菌力。

亚硫酸钠

亚硫酸钠也具有良好的还原性，可以与氧化性物质拮抗而起到相互消除作用，但其本身具有一定的杀菌作用。

Letheen肉汤

Letheen肉汤是一种广谱中和剂配方，牛肉浸出粉、月示蛋白胨、吐温80、卵磷脂、氯化钠等成分，可以中和季铵化合物或阳离子表面活性剂、对强酸、含氯消毒剂也有较好的中和作用，对过氧乙酸和过氧化氢的中和作用稍弱。

NB（neutralizing buffer）中和缓冲液

NB中和缓冲液由磷酸盐,硫代硫酸钠,芳基磺酸盐络合物等多种化合物根据适当比例调配而成，主要对季铵盐类和过氧化物类消毒剂如氟、氯、溴、碘等卤素类消毒剂有比较好的中和效果。

D/E（Dey-Engley Neutralizing Broth）中和缓冲液

D/E中和缓冲液是一种在食品卫生领域中应用较广的中和剂组方。该组方中主要含有吐温 80、卵磷脂、硫代硫酸钠、重亚硫酸钠、硫胶质钠、葡萄糖、溴甲酚紫、酵母提取粉、酪蛋白胨等物质，是一种紫色液体。曾被美国公共卫生协会(APHA)推荐用于含有防腐剂的食品微生物检测。D/E中和缓冲液可有效中和多种消毒剂，如季铵盐类消毒剂、酚类消毒剂、醛类消毒剂、含氯消毒剂、含碘消毒剂以及汞类等，是一种广谱中和剂。

1. 在清洗消毒验证中的作用及评估

鉴定试验是评价消毒剂杀菌效果和清洁验证的关键步骤，只有适当的广谱中和剂配方，配合互相兼容的采样工具和检测方法，才能有效的从食品和饮料行业中的典型环境表面类型中采集和回收细菌，进而全面、准确地评估车间各种清洗消毒作业的有效性。