病毒大规模培养神器

微载体 Cytodex

入门篇

近期疫情逐渐稳定，希望新的一年大家心宽体「胖」。 因为微载体的贴壁培养工艺广泛应用在疫苗的大规模生产中，接下来，咱们就聊聊病毒大规模培养的神器-微载体。那么什么是微载体？不同类型微载体的特点？微载体如何操作？以及有哪些成功的应用案例呢？

图 1 Cytodex 微载体上的 Vero 细胞（染色）

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什么是 Cytodex 微载体？

Cytodex 微载体是专门为培养各种动物细胞的高产量而开发的，针对不同类型动物细胞，有 Cytodex 和 Cytopore 两个系列（见图 1），在这里详细地给大家介绍下 Cytodex。

Cytodex 微载体（Cytodex 1&3）是基质为葡聚糖的微球，细胞可贴附微球 2D 表面生长，1 g 的 Cytodex1 微载体提供 4400 cm 2 的表面积给细胞贴附。 Cytodex 1几乎适合所有贴壁细胞。 Cytodex 3表面包被胶原，适合无血清培养基培养。除标准的 Cytodex 产品外， Cytodex 还有经过 Gamma 射线灭菌的产品，无需繁琐的水化灭菌，可以直接使用。

Cytodex 微载体的特点

①表面特征经过优化，适于细胞高效粘附和伸展；

②大小和密度经过优化，有利于均匀悬浮，适于宽范围的细胞优良生长和高产；

③基质是生物惰性的，为搅拌培养提供了一个坚硬但是非刚性的底物；

④透明，贴附的细胞用简单的显微镜就能观察到。

⑤可放大性好。动物细胞悬浮培养已经达到 15,000 L 规模，贴壁依赖型细胞的微载体培养已经达到 6,000 L 规模。

表 1 微载体的详细参数

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微载体有哪些应用？

微载体的应用领域非常广泛，疫苗、单克隆抗体、天然和重组蛋白，还有前景广阔的免疫细胞治疗领域。

欧洲和世界范围内的许多国家的绝大多数减毒或灭活疫苗类型的人用和兽用疫苗都在使用微载体进行生产（见表 2）。基于微载体生产的疫苗包括脊髓灰质炎、风疹、狂犬病、流感、日本脑炎（乙型脑炎）、呼吸道合胞病毒（RSV）和口蹄疫（FMD）疫苗等。与其他细胞培养工艺相比，微载体培养工艺可以提高产量，降低成本，并减少污染。Sinskey 等人观察，使用微载体培养工艺，新德毕斯病毒（Sindbis virus）的单位体积产量可以达到滚瓶培养的 50 多倍。

表 2 微载体在疫苗工业中的应用状况

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Cytodex 微载体

可以培养哪些细胞？

实际上，所有培养的动物细胞类别都可培养。Cytodex1 微载体是一般应用的细胞培养表面，凡是能在体外贴壁的细胞将都能够粘附到 Cytodex1 微载体上。Cytodex3 也为许多在玻璃或者塑料表面粘附或者功能较弱的细胞 类型提供了一个改良的培养表面。

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表 3 按组织分类的在 Cytodex 微载体上培养的细胞类型列表

哺乳动物、禽类、鱼和昆虫细胞已经在 Cytodex 微载体上培养, 它们具有广泛的组织来源，包括 原代细胞， 二倍体细胞株和 传代/转化的细胞系。杂交细胞系和肿瘤来源的细胞系也可以，根据相关统计大约有 150 多种细胞可以在 Cytodex 微载体上培养。

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