简要说明

YM4271菌株，MATa型，可直接转化质粒或与MATα型酵母菌株EGY48、Y187等通过mating操作进行蛋白互作验证或筛库试验。Transformation marker为：trp1，leu2，ura，报告基因为： HIS3。可用于酵母双杂，酵母单杂或异源蛋白表达等试验。YM4271感受态细胞经特殊工艺制作pGADT7质粒检测转化效率>104 cfu/μg DNA。

操作说明

1、取一支无菌的1.5ml EP管，依次加入预冷的目的质粒1-3µg，Carrier DNA 10µl(95-100 度5min 快速冰浴，重复一次)，100µl冰上融化的感受态细胞，PEG/LiAc 500µl，轻轻翻转混匀6-8次；

2. 30℃水浴30min，每10min轻轻翻转混匀6-8次；

3. 每支加入20µl的二甲基亚砜；（用于提高转化效率,可不做）

4. 42℃水浴15min，每5min轻轻翻转混匀6-8次；

5. 12000rpm瞬时离心弃上清，每支加入1ml的YPDPlus于30℃复苏1h；（用于提高转化效率，可不做）

6. 12000rpm瞬时离心弃上清，用100µl 0.9%NaCl重悬，涂板，30℃培养48-96h。

注意事项

1、感受态细胞最好在冰上融化。

2. PEG溶液在低温环境下会析出，请于常温下溶解后使用。