厌氧菌临床检验的重要性

     厌氧菌检验是临床微生物检验的重要组成部分。在无氧（或少氧）条件下,或氧化还原电势低的条件下才能繁殖的细菌称为厌氧菌。

     厌氧菌在人体肠道、口腔、上呼吸道、泌尿生殖道等处的正常菌群中占有优势,如长期使用广谱抗生素、激素、免疫抑制剂等，在发生菌群失调或机体免疫力下降或细菌进入非正常寄居部位时，厌氧菌可能发生严重的甚至致死的内源性厌氧菌感染。厌氧菌感染常发生在深部伤口,但也可伴兼性厌氧菌和需氧菌侵犯人体任何器官和组织,当深部脓肿、败血症等常规细菌学检查阴性时,往往源于厌氧菌感染。据文献报道，牙周炎及牙根管炎厌氧菌感染率高达96.67%～100%[1,2];肛周、腹部和肺部厌氧菌感染率也比较高,厌氧菌和需氧菌混合性感染率达72%～91.7%[1,3];肺部感染和肺脓肿厌氧菌感染率为40.1%～84.2%[4,5];病原菌以革兰阴性厌氧杆菌居多,其中类杆菌属为优势菌;机体免疫功能低下时,如癌症、骨髓移植等患者容易引发菌血症[6-8];重症监护病房的患者因长期住院,容易发生医源性感染。在妇产科各种感染性疾病中有100%,直肠周围脓肿有77%可检出厌氧菌,而且有相当一部分病例是单一的厌氧菌感染[1]。抗生素相关性腹泻中难辨梭菌的感染常通过接触方式传播,发生医院感染暴发流行,严重者导致死亡[9]。所以，对厌氧菌检验应给予高度重视。

     为全面协助临床诊断,防止感染性疾病被漏诊或误诊，现大部分医院微生物检验室开展厌氧菌鉴定与药敏。

     要成功分离厌氧菌首先是正确地选择标本:下列细菌学指征有助于选择标本做厌氧培养:（1）深部伤口或软组织脓肿的脓液,特别是伴有恶臭或含有硫磺颗粒时。（2）可疑为气性坏疽或少见的严重产气或坏死性感染所取得的坏死组织或病灶清除材料。（3）粘膜部位的感染灶取得的材料。（4）从脑、肺、肝或其他器官的脓肿或从腹腔内、肛周、隔下或其他部位的脓肿取得的材料。（5）无菌区感染灶的吸出液,包括血液、脑脊液、腹水、胸水、滑膜液或羊水等。（6）人或动物咬伤感染灶取得的材料。（7）变黑的或置于紫外线发红色荧光的渗出物。（8）革兰染色镜下,观察到具有厌氧菌*形态的材料。（9）可疑引起肉毒杆菌食物中毒的食物。

收集标本及运送对厌氧菌培养能否成功至关重要，须注意：标本不能被正常菌群污染；应尽量避免接触空气。

    正确地收集标本:厌氧菌是人体许多部位（如皮肤、口咽部、肠道和泌尿生殖道）正常菌群中的一部分,因此下列材料无需做厌氧培养:（1）咽、鼻、尿道、阴道或直肠拭子、牙拭子。（2）咳出的痰,通过支气管镜取的分泌物,排出或导出的尿、粪便及胃内容物。（3）前列腺分泌物。为排除或尽量减少正常菌群中厌氧菌的污染,用注射器抽取标本比用拭子更好,特别适用于下列临床情况:（1）从未开放的脓肿抽取脓液。（2）通过胸腔穿刺抽出的胸腔液。（3）尿（从耻骨联合上方做膀胱穿刺吸出或从肾造口管收集）。（4）肺分泌物（气管切开吸取）。（5）腹腔液（穿刺抽出）。（6）通过腰椎穿刺抽出脑脊液。（7）窦道标本可插入小导管,用注射器吸出。也可自窦道损伤部位取材做活组织检查。注射器和针头内的气体应全部排出，针头插入无菌橡皮塞，隔绝空气，即可送到实验室。如果必须使用拭子,应尽快接种于适宜培养基中。在运送过程中要保持厌氧状态。培养基内不应含有肝素,因它会抑制细菌生长。

     实验室接到标本后，在20～30分钟内接种标本于厌氧培养基，并放入厌氧箱内进行培养，置于37℃箱内培养2～7天，每天观察培养基上菌落生长情况，血液等液体直接接种于血液检测仪培养基，血液检测仪能快速检出血液中厌氧菌。挑取可疑菌落作鉴定与药敏试验，使用微量生化系统鉴定待测菌或冷藏长期存储。

    厌氧菌作为重要的条件致病菌,所致感染已日益受到关注。很多医院微生物室（如深圳第二人民医院、深圳港大医院、深圳福田医院、深圳骨科医院、深圳孙逸仙医院、广东省人民医院、中山大学附属口腔医院、中山大学附属*医院、中山大学附属第六医院、南方医院、广州医学院附属医院、广州市第二人民医院、广州第八人民医院等等）与深圳华大基因研究院等机构合作开展厌氧菌鉴定与药敏试验，迅速协助临床对厌氧菌感染及时作出诊断与选择有效的用药方案。