用于测量样品的比色皿是分光光度计光学系统的一部分。因此，比色皿的位置、几何形状和状况会影响吸光度测量的精确度，应仔细把控。

比色皿的光程长度是指光线穿过比色皿内壁的距离。

对于标准型分光光度计比色皿，光路或光程长度是指前窗与后窗之间的距离。标准型比色皿的光程长度为10 mm。

比色皿的材质会因波长而产生自身的吸光度。石英比色皿在整个测量范围（紫外可见分光）内都是半透明的。一次性塑料比色皿通常只是在光谱的可见光范围内是半透明的。因此，比色皿的选择主要取决于应用。

根据比尔-朗伯定律，吸光度与比色皿光程和样品浓度成正比。如果选择理想的光程（如1mm-5cm），则不再需要稀释。0.2A到1.5A之间的吸光度会产生最准确的结果。光程较短（1 mm或0.1 mm）的超微量分光光度计非常适合高浓度样品。