RAW264.7细胞质粒转染试剂进入细胞后可以被代谢的新型小分子多肽转染试剂，对细胞无毒性，不易出现细胞死亡，不激活细胞免疫机制。

一、RAW264.7细胞质粒转染试剂产品详情：

Zeta Life 公司与美国加利福尼亚大学旧金山校区联合开发用于哺乳动物细胞、活体动物转染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子转染试剂，此技术成为新的蛋白功能、免疫细胞及干细胞治疗、研发及生产的主要关键技术之一。Zeta Life转染试剂可转染极度难转染的免疫细胞、悬浮细胞，如:T细胞、NK细胞、人淋巴细胞、THP-1等；可高效率转染siRNA到任何哺乳动物细胞;用于将 DNA 和 siRNA 转染到真核细胞系和各种原代细胞中；转染细胞后可10小时内快速代谢的第三代新转染试剂。

二、产品说明：

1、产品名称

Advanced DNA RNA Transfection Reagent

2、包装规格

货号：AD600025 、AD600050、AD600075、AD600150

规格：0.25ml、0.5ml、0.75ml、1.5ml

3、储存条件

常温运输，4℃保存，可保存两年，拒绝反复冻融。

三、RAW264.7细胞质粒转染试剂转染质粒大小6000bp效果图和转染操作方法

操作方法

提前 1 天接种细胞：细胞汇合度在 60-80%左右，再进行转染。

核酸复合物制备：将核酸与转染试剂按照 1:1 关系直接混合，用移液器吹吸 10-15 次混匀，室温静 止 10-15 分钟。

在细胞培养基中加入核酸复合物：根据参考用量在细胞中加入核酸复合物，并轻轻混匀；细胞培养基 里面可以含有血清。

细胞换液：转染 24 小时后对细胞进行正常换液，悬浮细胞转染过程中不用换液。

分析结果：质粒 DNA 转染 48-72 小时后荧光检测转染效率，48-96 小时检测 mRNA 或蛋白表达。若 进行稳定表达细胞株的筛选，则在转染后 24-48 小时左右加入适量的药物进行筛选。siRNA 转染后 9 小时荧光检测转染效率，48-72 小时检测 mRNA 或蛋白表达。

四、注意事项：

1、质粒 DNA 必须溶解于无菌双蒸水或超纯水，但不能溶解于提取试剂盒提供的 Buffer。溶解于 Buffer 的质粒转染效率会下降 80%左右，甚至会转染失败。

2、质粒必须去除内毒素，内毒素对细胞将产生很大的细胞毒性，会导致转染效率下降 70%-80%左 右，甚至导致转染失败（推荐使用 Qiagen、TIANGEN、Omega 去内毒素质粒提取试剂盒）。

3、复合物的制备过程中是绝不能用其他任何试剂对核酸或转染试剂进行稀释，只需将核酸和转染 试剂两者按 1:1 比例直接混合，如果进行了稀释会导致转染失。

4、转染试剂与核酸混匀后用移液器吹打 10-15 次，室温孵育 10-15 分钟后即可加入细胞培养板。

5、转染 24 小时后进行正常换液，不能像 Lipo2000 一样转染 4-6 小时后换液。

6、原代细胞、免疫细胞转染时，细胞基础培养基里面不能含有双抗培养基。