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如何操作显微操纵器的要求,你知道吗?

时间:2022-06-27      阅读:715

   显微操纵器采用显微操作系统将供体物直接注入宿主细胞中,研究供体物的功能或者获得转基因动植物的技术。显微操作时显微镜的观察方式通常选择浮雕相衬观察方式,原因在于浮雕相衬系统能够产生高反差的3D图像,便于微操作手对样品精准的三维空间捕获及操控,如在细胞核膜可以更容易看到的情况下进行穿刺。在使用显微操纵器的使用我们要注意什么呢?
 
  1、在整个过程中,注射针尖应远离人员和实验室中的仪器。注射针在持针器上安装不牢时,注射器、管子及注射针内的压力,可能将注射针射出。
 
  2、在反向充填液体时,适当地在显微镜下观察注射针尖,以决定在加压时是否注射针阻塞或偏斜。阻塞通常可通过将针尖轻轻敲击一个固定物而得以缓解。针尖偏斜的注射针是适合于显微注射的,但其使用应做细微调整或补偿注射中加压所造成的额外偏斜。
 
  3、注射速度过快能扰乱细胞质成分,细胞裂解或细胞从底层移位。当注射体积小于估计的细胞体积的10%,并且注射样品的流动速度几乎不导致可见的细胞质移位时,注射效果好。
 
  4、用紫外光可看到注入标记物后的活细胞,但会对细胞造成不可恢复的损伤,因此应尽可能缩短紫外光照射时间。
 
  5、如果对已经注射的细胞进行免疫荧光测定或其他处理,最好使用可固定的葡聚糖,以防在冲洗中造成标记物的扩散损失。
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