高压灭菌器可杀灭包括芽胞在内的所有微生物。在103.4kPa（1.05kg/cm2）蒸汽压下，温度达到121.3℃，维持15～20分钟。适用于普通培养基、生理盐水、手术器械、玻璃容器及注射器、敷料等物品的灭菌。

　　高压蒸汽灭菌的时间计算，应从灭菌器柜室内达到要求温度时算起，至灭菌完成为止。

　　总时间包括：热力穿透时间，即从消毒柜内达到灭菌温度至消毒物品中心部位亦达到灭菌温度所需时间。时间的长短取决于消毒物品的性质、包装的大小,放置位置和高压锅内空气排空程度和灭菌器的种类。消毒维持时间，即杀灭微生物所需的时间，一般用杀灭脂肪嗜热杆菌芽胞所需时间来表示。

　　在115℃时需30分钟，121℃时需12分钟，132℃时需2分钟。安全时间，一般为维持时间的一半，其长短视消毒物品而定。对易导热的金属器材的灭菌，不需要安全时间。

　　一般下排气式高压灭菌器所需时间为：115℃30分钟，121℃15分钟，126℃10分钟。115℃常用于制药工业上的灭菌。在微生物实验室内，有些含糖培养基亦用115℃30分钟灭菌，因为在更高温度下糖会分解。121℃～126℃常用于医疗卫生和防疫工作中的灭菌。

　　以上所述知识灭菌时间的概数，1次灭菌中具体使用多少时间，需要根据物品的种类、包装的大小、安放情况和灭菌器的性能来确定。下表提供的数据可供实际工作中参考。