1.质粒质量：请务必使用高纯度无内毒素转染级质粒。通过260nm光吸收测定DNA浓度，260nm/280nm比值确定DNA纯度（比值应该在1.8～2.0的范围之内）。如有可能，请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。

 

　　2.细胞条件：使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保细胞没有被细菌、真菌或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。建议使用GIBCO或者李记生物的胎牛血清培养细胞。

 

　　3.细胞培养液要求：EZTrans细胞转染试剂可用于有血清培养基的转染，并且转染前不需要换培养基。但是，制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释DNA和转染试剂，因为血清会影响复合物的形成。确保细胞培养液没有被细菌、真菌或支原体污染。转染时培养液中不添加抗生素。

 

　　4.DNA浓度和EZTrans细胞转染试剂量的优化：DNA浓度和转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响，初次使用应优化DNA浓度和转染试剂量以得到最大的转染效率。使用者可尝试每1μgDNA使用1～4μL体积线性PEI转染试剂进行优化。DNA和转染试剂的比例，通常推荐是1:2~1:5。