利用岛津荧光分光光度计实现荧光标记样品的检测与定量分析
时间:2024-03-19 阅读:523
一、岛津荧光分光光度计主要由光源、激发单色器、样品池、发射单色器和检测器等部分组成。其工作原理如下:
1.光源:产生紫外-可见光,照射到样品上,使样品发射荧光。
2.激发单色器:将光源产生的复合光分解为单色光,即只允许特定波长的光线通过,用作激发光。
3.样品池:放置待测样品的区域。
4.发射单色器:将样品发射的荧光分解为单色光,即只允许特定波长的光线通过,用作发射光。
5.检测器:接收通过发射单色器的荧光,将其转换为电信号,然后通过放大和处理,显示为荧光强度。
二、荧光标记样品的制备
1.选择荧光染料:根据待测样品的性质和实验要求,选择适当的荧光染料。
2.荧光标记:将荧光染料与待测样品结合,形成荧光标记样品。常见的荧光标记方法包括化学反应、物理吸附等。
三、荧光标记样品的检测与定量分析
1.波长选择:根据荧光染料的性质,选择适当的激发波长和发射波长。
2.荧光强度测量:将荧光标记样品置于样品池中,选择与激发波长和发射波长对应的单色器,测量荧光标记样品的荧光强度。
3.定量分析:根据荧光强度与待测样品浓度之间的关系,进行数据处理和分析。通常,可以通过绘制标准曲线,将荧光强度转换为待测样品的浓度。
四、应用领域
利用岛津荧光分光光度计进行荧光标记样品的检测与定量分析广泛应用于生物、医药、化学等领域。例如,在生物医学领域,可以用于蛋白质、核酸等生物分子的检测和定量;在化学领域,可以用于有机化合物的结构分析和定量。