摘要

本文以半胱氨酸连接的抗体药物偶联物 (Antibody-Drug Conjugate, ADC) 为研究对 象，使用连接 PLRP-S 反相液相色谱柱的 Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统分离还 原的轻链、重链和相对应连接药物的轻重链，并通过 Agilent 6530 高分辨率四极杆飞 行时间 (Q-TOF) 液质联用系统对各个色谱峰进行鉴定。通过积分处理紫外吸收图谱中 各轻重链的峰面积百分比，结合各个峰的偶联药物数目，计算 ADC 的加权平均药物/抗 体比率 (Drug to Antibody Ratio, DAR)。同时使用了安捷伦 DAR 计算器 (Agilent DAR Calculator) 对质谱解卷积结果进行 DAR 值计算，所得结果与紫外吸收图谱计算所得结果相同

前言 维布妥昔单抗是一类半胱氨酸连接的抗体药物偶联物 (Antibody-Drug Conjugate, ADC)， 抗体通过部分还原使链间二硫键转换成游离的半胱氨酸残基，半胱氨酸残基再与小分子 药连接形成了一种包含 0-8 个药物复合抗体的混合物，如图 1 [1] 所示。药物/抗体比率 (Drug to Antibody Ratio, DAR) 是抗体所连接药 物数量的平均值，它能够显著影响 ADC 效果，是衡量 ADC 质 量的关键属性。低的 DAR 值可能会导致疗效的下降，而较高的 DAR 值又可能会影响 ADC 的安全性，因此对 ADC DAR 的检测 至关重要。 本文以维布妥昔单抗为研究对象，使用反相液相色谱和四极 杆飞行时间质谱联用系统，对还原 ADC 的各个组分进行色谱分离、 二极管阵列检测器检测和质谱鉴定，并分别通过紫外吸收图谱结 果和质谱解卷积结果计算 ADC 的 DAR。

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