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人抗dsDNA IgG ELISA试剂盒具有高灵敏度适用于定量或滴定IgG抗体的免疫测定血清或血浆中dsDNA的特异性活性。其他生物流体,包括组织培养基,可以验证使用。
作为Alpha Diagnostic International(ADI)在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐Alpha Diagnostic International(ADI)热销产品人抗 dsDNA IgG 高灵敏度 ELISA 试剂盒,96 次检测,定量。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
人抗 dsDNA IgG 高灵敏度 ELISA 试剂盒,96 次检测,定量 | ADI-3100-HS | 查看 |
人抗 dsDNA IgG 高灵敏度 ELISA 试剂盒,96 次检测,定量检测原理:
人抗dsDNA IgG ELISA试剂盒基于结合样品中人抗dsDNA IgG对dsDNA固定化的影响微孔。抗dsDNA IgG抗体通过与HRP(辣根)结合的抗人IgG特异性抗体检测过氧化物酶)酶。洗涤步骤后,显色添加基材(TMB),通过HRP在底物上的酶促反应
与体内存在的抗dsDNA IgG的量成比例样品。加入终止溶液以终止反应然后使用ELISA测量450nm处的吸光度微孔阅读器。样品中人IgG抗体的活性相对于抗DNA校准品计算。
特异性
使用纯化的双链DNA(dsDNA)包被微孔板;因此,该检测特异性针对dsDNA的抗体。抗人IgG HRP偶联物专门与人IgG类别的抗体反应,这些抗体能够与板上的dsDNA结合。IgA、IgM和IgE抗体不会在背景信号之上被测量。
高灵敏度
dsDNA包被水平、HRP偶联物浓度和低非特异性结合(NSB)样品稀释液被优化,以区分人血清样本中稀释1:1000的抗dsDNA IgG与背景(非抗体)信号。
校准品值
校准品是对dsDNA有反应的抗体的稀释液。值被赋予为任意的抗DNA活性单位。
注意事项和安全指南
校准品、样品稀释液和抗体HRP含有溴硝基二氧化物(BND:0.05%,w/v)。终止液含有稀释的硫酸。遵循良好的实验室操作规范,避免任何试剂与皮肤、眼睛或粘膜接触。所有试剂都可以用水大量稀释后排放。TMB、硫酸和BND的材料安全数据表(MSDS)可以请求或从ADI网站获取。
结果解释
方法A. 抗体活性阈值指数
将样本与100 U/ml校准值或内部对照比较 = 阳性/阴性截止
结果
检测抗dsDNA IgG的灵敏度被控制,使得使用50和200 U/ml校准品计算的100 U/ml校准值代表人血清稀释至1:1000或更高时大多数真正阳性的阈值OD。上图数据的视觉检查显示以下内容:
校准品 – 具有抗dsDNA反应的人血清稀释曲线显示了检测的OD范围;高值表示检测的最佳灵敏度。
100 U/ml:绘制了一条“截止”线,以指示区分阳性/阴性的阈值。这不是一个明确的阈值,而是一个低OD区域,可能代表低阳性或高背景阴性。
WHO参考试剂,针对人抗血清对dsDNA的反应,制备15/174;1 mU/ml = 检测中的320 U/ml。
内部对照 – 来自个体的样本,代表研究者在区分低阳性和阴性样本方面的经验(不在试剂盒中)。这应该在每次检测中运行,以补充校准品,评估可重复性,并在不同检测间进行标准化。
样本A、B、C、D – 3个样本(A、B、C)为阴性:低于阈值;1个样本(D)为阳性:明显高于阈值;
100 U/ml校准值可以用来计算一个阈值指数,该指数可以数值区分阳性/阴性(见第6页):
? 将每个样本OD除以100 U/ml校准OD。
高于1.0的值是阳性抗体活性的度量;低于1.0的为抗体阴性。
Alpha Diagnostic International(ADI)公司于1993年成立, 是一家美国私营生物技术公司,总部位于德克萨斯州圣安东尼奥,具有USDA认证的动物试验设施。公司致力于开发、制造和供应新型诊断和质量控制试剂及检测试剂盒,用于人类和动物的基础生物学和疾病研究。同时,还提供多肽合成定制服务和多抗产品以及其他抗体相关服务,例如纯化亲和素,酶耦联物,染料,荧光染料等。ADI旨在准确了解科学研究人员和诊断测试界的需求,并迅速提供有效的解决方案,成为科学界值得信赖的创新试剂和解决方案提供商。
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