分光光度计样品室中的光束为1条时叫单光束，2条时叫双光束。如图所示，单光束装置中，出自分光器的单色光直接入射检测器。在双光束装置中出自分光器的单色光被分割为样品光和参比光后，入射检测器。采用单光束方式的装置，配置简单、廉价。

1、双光束分光光度计 以两束光一束通过样品、另一束通过参考溶液的方式来分析样品的分光光度计。这种方式可以克服光源不稳定性、某些杂质干扰因素等影响，还可以检测样品随时间的变化等；
2、单光束分光光度计是由一束经过单色器的光，轮流通过参比溶液和样品溶液，以进行光强度测量。这种分光光度计的特点是：结构简单 价格便宜 主要适于做定量分析；
缺点是：测量结果受电源的波动影响较大，容易给定量结果带来较大误差，此外，这种仪器操作麻烦，不适于做定性分析。

一般测试单光束和双光束测试的结果应该一样的，但是测试样品的浓度范围双光束的更广，精度更高，稳定性更好等。