在ELISA试剂盒实验前的注意事项

 1、仔细阅读阐明书
 2、承认试剂盒在有效期内
 3、按阐明书承认全部试剂*（数量、体积）
 4、标本制备要标准，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备（贮存），尽量分装做备份。短期内无法实验者，注意低温保存
 5、准备好全部实验额外所需物品，如试管、吸头、移液器、离心机等
 6、依据检测标本数量承认所需试剂的量
 7、按阐明书将所用试剂平衡至室温，所需试剂
 ELISA实验时，注意事项如下：
 1.正式实验时，应别离以阳性对照与阴性对照控制实验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，阐明有非特异性反响，可采用羊血清、兔血清或BSA等关闭。
 2.在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括：
 （1）固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其方式可所以凹孔平板、试管、珠粒等。现在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在运用前均可进行选择：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反响，查询其显色反响是否均一性，据此判明其吸附功用是否杰出。
 （2）包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有必定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后，在其它实验条件相一起，查询阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。关于大都蛋白质来说一般为1～10μg／ml。