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大鼠皮肤T细胞虏获趋化因子ELISA检测试剂盒​操作步骤

时间:2022-03-03      阅读:253

大鼠皮肤T细胞虏获趋化因子ELISA检测试剂盒操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族13抗体

β淀粉样肽/Aβ 31-35 抗体

β淀粉样肽 1-40抗体

β-抑制蛋白2抗体/β休止蛋白2/β-arrestin抗体

炭疽杆菌抗体

肾上腺皮质发育异常蛋白抗体

血管紧张素Ⅱ1A型受体抗体

ABI1/SSH3BP1蛋白抗体

乙酰化组蛋白H1b抗体

磷酸化雄激素受体抗体

多功能DNA修复酶抗体

AP2关联激酶1抗体

水通道蛋白1抗体

AATK细胞凋亡关联酪氨酸激酶抗体

ATP结合蛋白家族5抗体

N-甲基嘌呤DNA糖基化酶

AU5 tag标签抗体

钙离子ATP酶通道蛋白抗体

果桃α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗体

脂肪炎症因子Apelin抗体

氢钾ATP酶通道蛋白抗体

ATP5A抗体

即刻早期基因ARC抗体

ADP核糖基化因子6抗体


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