捻转毛细线虫探针法荧光定量PCR试剂盒实验操作:

1. 模板制备（样本制备区）

建议使用配套水生动物病害基因组 DNA/RNA 提取试剂盒系列产品，具体过程详见产品说明书。

2．添加模板（模板添加区，放置于冰盒中进行）

请于-20℃条件下保存，有效期 12 个月

取出所需测试数的已含有反应液 A-TSV-I 的 PCR 管，将试剂*解冻，离心 30 秒，在管盖上标记管名（阴性对照管 NG、样品 XX、阳性对照管 PG）。打开管盖向各管管底分别加入 0.8μL B-I 及 0.2μL R-I，盖上阴性对照管管盖，其他各管分别沿管壁加入 2μL 模板，顺序为待测样品模板、PG-TSV-I，依次盖好各管管盖，离心 30 秒，立即进行扩增反应。

3. 扩增反应（扩增及产物分析区）

①恒温仪器 63℃条件下反应 60 min。待仪器升温至 63℃后，新建程序，设置实验名称及反应时间，将步骤 2中离心后的 PCR 反应管放入恒温荧光分子检测仪，点击开始检测。

②若使用荧光定量 PCR 仪，则荧光基团选择 FAM，淬灭基团选择 None，将 63℃ 15 s，63℃ 45 s 作为一个循环，于 63℃ 45 s 处收集荧光信号，60 个循环。

其他仪器请参照仪器说明书进行设置。

设置qPCR反应（20 μL体系，在样品制备室进行）

10. 如果只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复，则反应设置数量相应增加2或3倍。

11. 在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加）：

人乌头酸酶1(ACO1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human ACO1 (Aconitase 1) ELISA Kit

人羧肽酶E(CPE)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CPE (Carboxypeptidase E) ELISA Kit 

人抗神经节苷脂M1抗体(Anti-GM1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human Anti-GM1 (Anti-Ganglioside M1 Antibody) ELISA Kit

人绒毛膜促性腺激素α肽(CGα)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CGα (Chorionic Gonadotropin Alpha Polypeptide) ELISA Kit

人血管紧张素III(Ang-III)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human Ang-III (Angiotensin III) ELISA Kit

人精氨酰tRNA合成酶(RARS)酶联免疫吸附测定试剂盒Human RARS (Arginyl tRNA Synthetase, cytoplasmic) ELISA Kit

人成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human FGFR3 (Fibroblast Growth Factor Receptor 3) ELISA Kit 

人成纤维细胞生长因子受体4(FGFR4)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human FGFR4 (Fibroblast Growth Factor Receptor 4) ELISA Kit 

人二肽基肽酶X (DPP10)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human DPP10 (Dipeptidyl Peptidase X) ELISA Kit

人细胞色素P450氧化还原酶(CPR)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CPR (Cytochrome P450 Reductase) ELISA Kit 

人细胞因子受体样因子1(CRLF1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CRLF1 (Cytokine Receptor Like Factor 1) ELISA Kit

人集落刺激因子2受体β (CSF2Rβ)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CSF2Rβ (Colony Stimulating Factor 2 Receptor Beta) ELISA Kit 

人碳酸酐酶III(CA3)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CA3 (Carbonic Anhydrase III, Muscle Specific) ELISA Kit

人抗胰岛素受体抗体(AIRA)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human AIRA (Anti-Insulin Receptor Antibody) ELISA Kit

人细胞色素P450家族成员1A1(CYP1A1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CYP1A1 (Cytochrome P450, family 1, subfamily A, polypeptide 1) ELISA Kit