猪血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)elisa试剂盒操作步骤
时间:2021-09-22 阅读:107
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。
甲砜霉素(T1100000
甲苯噻嗪 杂质E(Y0000159
甲苯噻嗪 杂质C(Y0000158
甲苯磺丁脲;甲糖宁(T1700000
脊髓灰质炎疫苗 (灭活 BRP (干冰运输(P2160000
脊髓灰质炎疫苗 (口服 BRP (干冰运输(P2161000
左旋肉碱(L0 99900
左旋咪唑:用于系统适用性试验(Y0000047
左旋咪唑 - 对照谱图(Y0000048
左旋甲状腺素钠(L0570000
左旋多巴(L0400000
左炔诺孕酮(L0551000
左美丙嗪盐酸盐(L0500000
左美丙嗪马来酸盐(L0505000
左卡尼汀杂质A;左旋肉毒碱杂质A(L0 99905
左卡巴斯汀杂质D(L0 90008
组胺磷酸盐(H0700000
棕榈酸异丙酯(I0725000
棕榈酸(P0090000
紫杉醇杂质C(Y0000699
紫杉醇(天然:用于峰鉴别试验(Y0000700
紫杉醇(半合成:用于系统适用性试验(Y00007 9
紫杉醇(半合成:用于峰鉴别试验(Y0000719
紫杉醇(Y0000698
猪胰岛素(I0 20000
制霉菌素(N1400000
脂蟾毒配基,蟾力苏,酯蟾毒配基180555
硬酯酸甲酯C18(M1770200
硬脂酸胆固醇酯0 5805
硬脂酸胆固醇酯0 5801
茚地那韦:用于系统适用性试验(Y0000746
茚地那韦(Y0000788