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植物内源基因tRNA-Leu核酸检测试剂盒​反应五要素

时间:2021-10-13      阅读:269

植物内源基因tRNA-Leu核酸检测试剂盒反应五要素:


参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+


引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:


①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。


②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。


③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。


④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。


⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。


⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。


⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。


引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

植物生长激素ABP1抗体

肌动蛋白相关蛋白1抗体

α红细胞分化相关因子抗体

血管紧张素激活蛋白1抗体

Alpha清蛋白抗体

AFAP1L2抗体

神经细胞分化相关蛋白AHNAK抗体

粘合连接相关蛋白1抗体

去整合素样金属蛋白酶13抗体

聚集蛋白抗体

转录因子AP2α+β抗体

磷酸化腺瘤样息肉抗体

磷酸化细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体

细胞周期后期促进蛋白亚基10抗体

细胞周期后期促进蛋白亚基11抗体

腺瘤性结肠息肉病蛋白2抗体

磷酸化细胞分裂周期蛋白16抗体

DNA修复酶相互作用蛋白抗体

脂肪细胞膜相关蛋白抗体

载脂蛋白A1结合蛋白抗体抗体

载脂蛋白B-mRNA编辑酶复合物1抗体

载脂蛋白B-mRNA编辑酶复合物2抗体

载脂蛋白B-mRNA编辑酶复合物3B抗体

载脂蛋白B-mRNA编辑酶复合物3C抗体

载脂蛋白C1抗体

载脂蛋白C2抗体

载脂蛋白L1抗体

载脂蛋白L4抗体

载脂蛋白L5抗体


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