乳酸脱氢酶(LDH)测试盒洗涤方法
时间:2021-11-23 阅读:226
乳酸脱氢酶(LDH)测试盒洗涤方法:
1. 自动洗板机:每孔加入洗涤液350μl,注入与吸出间隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩尽孔内液体,在洁净的吸水纸上拍干,每孔加洗涤液350μl,浸泡1-2分钟,吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体,在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。
实验开始前,各试剂均应平衡至室温;试剂或样品配制时,均需充分混匀,并尽量避免起泡。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜,37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制),酶标板加上覆膜,37℃温育1小时。
3.弃去孔内液体,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分钟,大约350μl /每孔,甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl,加上覆膜,37℃温育1小时。
5.弃去孔内液体,甩干,洗板5次,方法同步骤3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显色情况酌情缩短或延长,但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时,即可终止)。
7.每孔加终止液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。
8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。
9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。
脱硫弧菌脱硫亚种(脱硫微螺菌、脱硫螺菌、脱硫杆菌、脱硫芽孢弧菌、脱硫弧菌)
厌氧消化链球菌
铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)
纤维纤维微菌
长野解普鲁兰杆菌
变异链球菌
人苍白杆菌
戊糖乳杆菌
菊糖芽孢乳杆菌
豇豆慢生根瘤菌
长双歧杆菌
鳆发光杆菌
斯氏梭菌
嗜盐四联球菌
海苏特氏菌
耐久肠球菌(坚韧链球菌)
海氏肠球菌
盲肠肠球菌
伴放线放线杆菌
类干酪乳杆菌类干酪亚种
嗜肺军团菌
谷氨酸棒状杆菌(黄色短杆菌)
发酵纤维单胞菌
长赤细菌
海洋盐单胞菌
Georgenia muralis
河流弧菌
善变副球菌
干酪棒杆菌(乳酪棒杆菌)
沼泽红假单胞菌
深红红螺菌
金黄色葡萄球菌金黄亚种
肠炎沙门氏菌亚利桑那亚种
类红红细菌
短短芽孢杆菌
肠膜明串珠菌
韩国丛毛单胞菌
土白蚁丛毛单胞菌