激光共聚焦荧光显微镜 活体荧光物质检查
时间：2023-08-10 阅读：595
激光共聚焦荧光显微镜 活体荧光物质检查
激光共聚焦显微镜，简称CLSM（Confocal Laser Scanning Microscopy），是一种利用激光共振效应进行成像的显微镜。它通过使用激光束扫描样品的不同层面，将所得到的图像合成成一幅清晰的三维图像。与传统显微镜相比，激光共聚焦显微镜具有更高的分辨率和更强的穿透能力，可以观察到更加细微的结构和更深层次的物质。
在活体荧光物质的检查中，激光共聚焦显微镜发挥了重要的作用。通过标记活体细胞或组织的特定结构或分子，激光共聚焦显微镜可以实时观察到这些结构或分子的活动和分布情况。
在生物医学领域，它可以用于观察细胞的生长、分裂和死亡过程，研究细胞信号传导和分子交互作用等。在药物研发中，它可以用于观察药物在活体细胞或组织中的分布情况，评估药物的疗效和毒性。此外，在神经科学领域，激光共聚焦显微镜可以用于观察神经元的活动和连接，揭示大脑的工作机制。
NCF950激光共聚焦显微镜较宽场荧光显微镜的优点：
l 能够通过荧光标本连续生产薄（0.5至1.5微米）的光学切片，厚度范围可达50微米或更大。（主要优点）
l 控制景深的能力。
l能够从样品中分离和收集焦平面，从而消除荧光样品通常看到的焦外“雾霾”，非共焦荧光显微镜下无法检测到。（最重要的特点）
l 从厚试样收集连续光学切片的能力。
l 通过三维物体收集一系列图像，用于二维或三维重建。
l收集双重和三重标签，精确的共定位。
l 用于对在不透明的图案化基底上生长的荧光标记细胞之间的相互作用进行成像。
l 有能力补偿自发荧光。
耐可视共聚焦成像效果图 尼康共聚焦成成像效果图
NCF950激光共聚焦显微镜应用，共聚焦显微镜在以下研究领域中应用较为广泛：
1、细胞生物学：细胞结构、细胞骨架、细胞膜结构、流动性、受体、细胞器结构和分布变化、细胞凋亡；
2、生物化学：酶、核酸、FISH、受体分析
3、药理学：药物对细胞的作用及其动力学；
4、生理学：膜受体、离子通道、离子含量、分布、动态；
5、遗传学和组胚学：细胞生长、分化、成熟变化、细胞的三维结构、染色体分析、基因表达、基因诊断；
6、神经生物学：神经细胞结构、神经递质的成分、运输和传递；
7、微生物学和寄生虫学：细菌、寄生虫形态结构；
8、病理学及病理学临床应用：活检标本的快速诊断、肿瘤诊断、自身免疫性疾病的诊断；
9、生物学、免疫学、环境医学和营养学。
NCF950激光共聚焦显微镜配置
NCF950激光共聚焦配置表 | |
激光器 | 激光405 nm、488 nm、561 nm、640 nm |
探测器 | 波长：400-750nm，探测器：3个独立的荧光检测通道；1个DIC透射光检测通道 |
扫描头 | 最大像素大小：4096 x 4096 扫描速度：2 fps（512 x 512像素，双向），18 fps（512 x 32像素，双向），图像旋转: 360° |
扫描模式 | X-T, Y-T, X-Y, X-Y-Z, X-Y-Z-T |
针孔 | 无级变速六边形电动针孔；调节范围：0-1.5毫米 |
共焦视场 | φ18mm内接正方形 |
图像位深 | 12bits |
配套显微镜 | NIB950全电动倒置显微镜 |
光学系统 | NIS60无限远光学系统（F200) |
目镜(视野) | 10×(25)，EP17.5mm，视度可调-5～+5，接口Φ30 |
观察镜筒 | 铰链式三目观察镜筒，45度倾斜，瞳距47-78mm，目镜接口Φ30，固定视度；1）目/摄切换：（100/0,50/50,0/100)；2）目视/关闭目视/可调焦勃氏镜 |
NIS60物镜 | 10×复消色差物镜，NA=0.45 WD=4.0 盖玻片=0.17 |
20×复消色差物镜，NA=0.75 WD=1.1 盖玻片=0.17 | |
60×半复消色差物镜，NA=1.40 WD=0.14 盖玻片=0.17 油镜 | |
100×复消色差物镜，NA=1.45 WD=0.13 盖玻片=0.17 油镜 | |
物镜转换器 | 电动六孔转换器（扩展插槽），M25×0.75 |
聚光镜 | 6孔位电动控制：NA0.55，WD26；相衬(10/20,40,60选配） |
DIC（10X，20X/40X）选配.空孔 | |
照明系统 | 透射柯拉照明，10W LED照明； |
落射照明：宽场光纤照明 | |
中间倍率切换 | 手动1X，1.5X、共焦切换 |
机身端口 | 分光比： |
左侧:目视=100：0；右侧:目视=100：0； | |
平台 | 电动控制：行程范围130 mm x100 mm （台面325 mm x 144 mm ）最大速度：25mm/s；分辨率：0.1μm - 重复精度：3μm。机械可调样品夹板 |
调焦系统 | 同轴粗微动升降机构，行程：焦点上7下2；粗调2mm/圈，微调0.002mm/圈；可手动和电动控制，电动控制时，最小步进0.01um； |
DIC插板 | 10X，20X，40X插板；可放置于转换器插槽；选配 |
控制 | 摇杆，控制盒，USB连接线 |
软件 | 软件：NOMIS Advanced C |