转基因植物Bt基因PCR检测试剂盒操作流程
时间:2020-02-19 阅读:197
新春佳节来临之际,祝福每一位勇敢的湖北人民,祝福每一位还在一线与病毒作顽强斗争的医护人员,祝福你们在新的一年里身体安康、阖家幸福。接下来介绍 转基因植物Bt基因PCR检测试剂盒操作流程
以下原则:
1、引物应用核酸系列保守区内设计并具有特异性。
2、 产物不能形成二级结构。
3、引物长度一般在15~30碱基之间。
4、G+C含量在40%~60%之间。
5、碱基要随机分布。
6、引物自身不能有连续4个碱基的互补。
7、引物之间不能有连续4个碱基的互补。
8、引物5′端可以修饰。
9、引物3′端不可修饰。
10、引物3′端要避开密码子的第3位。
PCR反应体系与反应条件:
标准的PCR反应体系
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul