进口elisa试剂盒三个步骤与事项
时间:2020-08-26 阅读:676
进口elisa试剂盒注意事项:
1、试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶*溶解后再使用。
2、实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3、浓度为0的S0号标准品即可视为阴性进口elisa试剂盒对照或者空白,按照说明书操作时样本已经稀释5倍,终结果乘以5才是样本实际浓度。
4、严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
所有液体组分使用前充分摇匀。
进口elisa试剂盒操作步骤:
1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
2、 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过进口elisa试剂盒氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复进口elisa试剂盒洗板5次(也可用洗板机洗板)。
3、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。