进口elisa试剂盒操作步骤与保存
时间:2020-10-21 阅读:412
进口elisa试剂盒处理和保存:
1、 真空采血针采集2ml新鲜血液,加入无菌试管中。
2、 按1:9加入抗凝剂(EDTA、草酸钠、肝素、枸橼酸钠),30分钟内于冰上分离血浆以减少血小板的污染;(也可以直接用抗凝管采集)。
3、 将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心5min,,将离心好的匀浆留上清,弃下面沉淀。
4、 取上清。 分装冻存备用。
5、 根据你的实验需要,取适量上清夜进行各种ELISA测定。 请注意指标说明书上对于抗凝血剂是否有特殊要求,建议使用EDTA。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。
进口elisa试剂盒注意事项:制备血浆标本需借助于抗凝剂EDTA,抗凝不*的标本因纤维蛋白原干扰而造成假阳性。
进口elisa试剂盒操作步骤:
1.从已平衡至室温的密封袋中取出试验所需板条,未用的板条和干燥剂请放回铝箔袋内压 实自封条,密封口袋,放回4℃。
2.空白孔加标准品和标本稀释液,其余相应孔中加标本或不同浓度标准品(100ul/孔),用封板胶纸封
住反应孔,36℃孵箱孵育90分钟。
3.提前20分钟准备生物素化抗体工作液。
4.洗板5次。
5.空白孔加生物素化抗体稀释液,其余孔加入生物素化抗体工作液(100ul/孔)。用新封板胶纸封住反应孔,36℃孵箱孵育60分钟。
6.提前20分钟准备酶结合物工作液。避光室温(22-25 ) ℃ 放置。
7.洗板5次。
8.空白孔加酶结合物稀释液,其余进口elisa试剂盒孔加入酶结合物工作液(100ul/孔)。用新封板胶纸封住反应孔,36℃孵箱,避光孵育30分钟。
9.打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。
10.洗板5次。
11.加入显色底物(TMB)100ul/孔,避光36℃孵箱,避光孵育15分钟。
12.加入终止液100ul/孔, 混匀后即刻测量OD450值(3分钟内)。在仪器保存读数结果并打印一份纸质结果。
13.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回电冰箱保存至有效期结束。