植物吸收的磷主要是H2PO4-的形态，因此土壤中速效磷含量是评价土壤对作物磷供应能力的一种手段，对于施肥有着直接的指导意义。用弱碱法提取碱溶性磷和吸附态磷，钼蓝与磷酸根生成880nm有特征吸收峰的物质，通过测定880nm光吸收，即可计算磷含量。

一、正式实验：

1、若预实验测定吸光值超出标准吸光值线性范围：高于最高值建议将样本适当稀释后再进行测定，低于低值建议适当增加样本质量W后再进行测定，并将改变后的W和D代入公式计算；

2、确定好最适实验条件后，正式实验样本制备同预实验样本制备；

3、正式实验按照预实验上机操作步骤进行（标准管和空白管预实验已做，正式实验可选做）。

二、结果计算：

1、以各个标准溶液的浓度为x轴，其对应的ΔA标准为y轴，绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将ΔA测定带入方程得到x（μg/mL）。

2、按样本质量计算：

土壤速效磷含量(μg/g土样)=x×V1÷（W×V1÷V）×D=x÷W×D

V1：加入样本体积，0.04mL； V：加入提取液体积，1mL；

W：样本质量，g； D：稀释倍数，未稀释即为1。

三、注意事项：

1、工作液应现配现用，正常颜色为浅黄色，如有变色或变蓝则均为失效。

2、此法具有微量、灵敏、快速的特点。所以对测定所用试管或EP管等试验器材均要求严格无磷。

3、显色结束后应立即检测。

4、用96孔板检测时，注意板孔中的液体有无气泡，如有气泡应排除气泡后再测定OD值。