耗氧量分析是研究代谢的有用工具。耗氧量测量结果是细胞代谢功能，更具体而言是线粒体功能的关键性指示。通过这类指标来探究活细胞代谢，可为细胞功能以及代谢变化在疾病进展中的作用提供深入洞察。

线粒体功能对细胞代谢、存活和能量产生至关重要。线粒体呼吸受损与病理状态（如癌症、缺血性再灌注损伤和神经退行性疾病）有关。线粒体毒性也是安全相关的抗药性和药物戒断症状的常见原因。

R01耗氧量分析可以实时测量全细胞或分离线粒体的耗氧量，是以高通量形式来评估用于代谢表征的细胞呼吸以及评估治疗对线粒体功能毒性作用的一种可靠方法。它可以使用荧光酶标仪在标准微孔板上进行有氧代谢的简单动力学测定。随着呼吸作用的进行，溶解氧被消耗，样品中的氧气浓度降低，导致R01 分析的信号增加，从而实现对耗氧量的测定。

R01是氧气敏感的荧光探针，最大激发波长为 468nm，最大发射波长为 603nm。其荧光通过分子碰撞与氧气反应，由O₂淬灭，在无氧条件下荧光强度更高，反之有氧条件下荧光强度变低，因此荧光信号的量与样品中细胞外O₂的量成反比，从而BBoxiProbe^® R01可被用于监测细胞外氧气消耗的变化。在测定中，耗氧率由荧光信号随时间的变化计算。细胞耗氧量增加，荧光信号的变化率增加；反之，耗氧量减少，荧光信号的变化率降低。

R01与O₂的这种反应是非破坏性且可逆的， R01没有细胞毒性，其是化学稳定的，惰性的，水溶性的和细胞不渗透的，不能透过完整的细胞膜。因此还可以同时与糖酵解， 线粒体膜电位JC-1， ROS和细胞ATP 、LDH等检测的试剂结合使用，进行多参数检测。

用R01进行细胞外耗氧检测方法及其简单，不需要适用特殊的仪器设备，只需要荧光酶标仪之类的荧光读板设备即可。可以用于直接，实时分析细胞呼吸和线粒体功能。适用于测量各种全细胞（贴壁和悬浮细胞），透化细胞，各种3D培养物，组织，小生物，球体，支架和基质等。还适用于分离的线粒体，分离的酶，细菌，酵母和霉菌等的细胞外耗氧情况测量。